...10×SSC:1.2mmol/L NaCl0.15mmol/L醋酸钠0.2mol/L NaPO4tRNA(SigmaR1759)4mg/ml(用TE缓冲液配),-4℃保存。TE缓冲液:10mmol/L Tris,1mmol/L EDTA,Ph...
...9-ethylcarbozole,AEC)显色液试剂:AEC 20mg二甲基甲酰胺(DMF)2.5ml0.05mol/L醋酸缓冲液(pH5.5)50ml30%H2O225ml配制方法:先将AEC溶于DMF中,再加入醋酸缓冲液充分混匀。临显色...
...15min,弃上清。(4)加入75%乙醇洗涤2次,离心弃上清,真空抽干。(5)加入适量1×TE溶解。如此可得线性化载体DNA。(6)测定DNA的含量。(7)加入线性载体DNA和含量3~4倍于载体的待插入DNA片段,连接缓冲液及T4连接酶适量至...
...(1)标本的处理:①取材部位为子宫颈管,男性为尿道,将灭菌白金耳深入宫颈管或尿道1cm左右,转动数圈,停留约30s,取出后置标本缓冲液中。② 衣原体DNA提取:将宫颈管内或尿道内刮取物置含0.5% NP-40、0.5%Tween 20,1%...
...固相的抗原或抗体称为免疫吸附剂。将抗原或抗体固相化的过程称为包被(coating)。由于载体的不同,包被的方法也不同。如以聚苯乙烯ELISA板为载体,通常将抗原或抗体溶于缓冲液(最常用的为pH9.6的碳酸缓冲液)中,加于ELISA板孔中在4...
...共价键交联在胶乳表面。化学交联一般通过缩合剂碳化二亚胺将胶乳上的羧基与被交联物上的氨基缩合在一起。这种用交联致敏的胶乳试剂性能稳定,保存期长。胶乳凝集试验分试管法与玻片法。试管法先将受检标本在试管中以缓冲液作倍比稀释,然后加入致敏的胶乳试剂,...
...LR-white作为包埋剂的(详见第七章 )。(二)应用生物素标记DNA探针-PA-gold电镜杂交技术(Binder et al,1986)1.固定现认为应用4%多聚甲醛加0.1%戊二醛在磷酸缓冲液中(pH7.4),为较理想的固定剂,也有主张...
...蛋白质分子扩散速度慢,不易透过半透膜,粘度大,在分离提纯蛋白质过程中,我们可利用蛋白质的这一性质,将混有小分子杂质的蛋白质溶液放于半透膜制成的囊内,置于流动水或适宜的缓冲液中,小分子杂质皆易从囊中透出,保留了比较纯化的囊内蛋白质,这种方法称为...
...2.6μl上述SPDP甲醇液,SPDP:蛋白=9.5,22℃,40min ,加入25μmol/L二硫苏糖醇(DTT)pH7.4缓冲液,22℃,25min,同上过Sephadex G-50,收集蛋白A峰。(3)取0.77mg/ml的PE和...
...通常将抗原或抗体溶于缓冲液(最常用的为pH9.6的碳酸缓冲液)中,加于ELISA板孔中在4℃过夜,经清洗后即可应用。如果包被液中的蛋白质浓度过低,固相载体表面有能被此蛋白质完全覆盖,其后加入的血清标本和酶结合物中的蛋白质也会部分地吸附于固相...
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