...1．杂交膜的选用杂交膜是一种多孔、表面积很大的固相载体，核酸一旦固定在上面，就可用杂交法进行检测。最常使用的膜是硝酸纤维素膜，用于放射性和非放射笥标记探针都很方便，产生的本底浅，与核酸结合的化学性质不是很清楚，推测为非共价键结合。经80℃...
...英国ALNYLAM生物技术公司的研究人员在日前出版的《自然》杂志上介绍，他们在RNA（核糖核酸）干扰技术上取得了突破。 RNA干扰是一种由导入的双链RNA诱发的“基因沉默”。在这一过程中，致病细胞中与导入的双链RNA有同源序列的信使RNA...
...rpm离心15min，弃上清。（8）用75%的酒精洗涤2次，每次均于4℃，10000rpm离心5min，弃上清。（9）真空抽干，并用适量1×TE溶解沉淀。如此即得所需DNA片段。三、地高辛配基随机标记DNA探针法（一）概述基因诊断是以核酸分子...
...凝集素可为荧光素、酶和生物素等所标记，分别进行下列染色法：1．直接法 标记物直接标记在凝集素上，使之直接与切片中的相应糖蛋白或糖脂相结合。（1）切片脱蜡至水。（2）凝集素标记物（100μg/ml），室温，30min。（3）TBS洗3次，...
...biotin）又称维生素H，分子量244.31，存在于蛋黄中。用化学方法制成的衍生物，生物素－羟基琥珀亚胺酯（biotin-hydroxysuccinimide，BNHS）可与蛋白质、糖类和酶等多种类型的大小分子形成生物素化的产物。亲和素与生物素的...
...DNA是遗传信息的载体，遗传信息的作用通常由蛋白质的功能来实现，但DNA并非蛋白质合成的直接模板，合成蛋白质的模板是RNA。正常细胞遗传信息的流向是：与DNA相比，RNA种类繁多，分子量相对较小，一般以单股链存在，但可以有局部二级结构，其...
...利用标记的核酸做探针与转化细胞的DNA进行分子杂交，可以直接筛选和鉴定目的序列克隆。常用的方法是将转化后生长的菌落复印到硝酸纤维膜上，用碱裂菌，菌落释放的DNA就吸附在膜上，再与标记的核酸探针温育杂交，核酸探针就结合在含有目的序列的菌落...
...胶体金与蛋白质的结合成功与否，取决于pH值，一般只有在蛋白质等电点（PI）略偏碱的条件下二者才能牢固地结合，因此，标记之前须将胶体金溶液的pH值调至待标记蛋白质的等电点略偏碱。需要提高胶体金的pH值时可用0.1molK2CO3，需要降低...
...以DNA为模板合成RNA是生物界RNA合成的主要方式，但有些生物像某些病毒，噬菌体它们的遗传信息贮存在RNA分子中，当它们进入宿细胞后，靠复制而传代，它们在RNA指导的RNA聚合酶催化下合成RNA分子，当以RNA模板时，在RNA复制酶作用...
...被称为“间期细胞遗传学分析法（Interphase Cytogenetics Analysis, ICA）。间期细胞遗传学的基本原理是利用合成的特异性DNA探针，标记以同位素、生物素、地高辛或荧光素，对外周血、肿瘤细胞或癌前组织的离散培养...
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