...1000ml，加入终浓度为0.1%～0.2%的DEPC，分装后高压灭菌，可室温保存。该液主要用于配制予杂交液及杂交后的各种洗脱液，以保持一定的离子强度。此外，在用于杂交的湿盒内也常用5×的SSC以保持一定湿度。2．Denhardt’s液通常配成...
...诊断衣原体感染单靠临床表现是不够的，必需经过一定的实验室检查，才能够确诊。常用的检查方法是衣原体培养、直接荧光抗体检测、酶标免疫反应和DNA探针与聚合酶链式反应(PCR)。 (1)衣原体培养 由于沙眼衣原体是在细胞内寄生，所以它只能在组织...
...RNA探针比cDNA探针的敏感性提高10倍以上，在许多优点。它们是单链，不需变性，也没有互补链的干扰，与靶基因杂交比DNA探针更稳定。Bio-11-dUTP可通过Sp6、T3和T7RNA聚合酶掺入到RNA转录子中。标记方法：其下列反应体积...
...);②应用限制性核酸内切酶消化制成线性DNA模板，在体外转录获得反意RNA探针(cDNA);③依照待测核酸的核苷酸序列，应用DNA合成仪合成寡聚核苷酸探针。cRNA和cDNA的常用标记物有32S、32P、3H等放射性核素和荧光素、生物素、...
...免疫酶细胞化学是免疫细胞化学（Immunocytochemistry,ICC）中最常用的方法之一，它是在抗原抗体特异反应存在的前提条件下，借助于酶细胞化学的手段，检测某种物质（抗原/抗体）在组织细胞内存在部位的一门新技术：即预先将抗体与酶...
...，用一种称之为限制性核酸内切酶的酶，将其切成细小的节段。通过电泳技术，在凝胶中分离这些片段，将其置于滤纸上，加上标记探针。因为探针只与它的镜像结合，可以鉴定、识别DNA片段。...
...敏感性为100％，特异性为92．4％。与细胞培养法比较，其符合率为96.7％。DIBA适用于大批量标本的检测，但结果需3天。 6．核酸探针 随着分子生物学技术的发展，DNA杂交技术已进入衣原体检测领域。以82S标记7Md质粒制备的探针，检出...
...费用较高。血清抗体的检测则不能确定是否有新近感染，也不以评价治疗的效果。而近年来发展起来的分子生物学技术简单、快速、可靠，不仅对Hp的诊断具有高度敏感性和特异性，而且还可以用于对Hp的分型。最早的研究方法是用限制性核酸内切酶直接消化培养，鉴定...
...生物素-补骨脂素是另一种生物素光敏物质，在长波长紫外线照射下与嘧啶碱基发生光化学反应，加成到DNA中，去除小分子后，得到生物素标记核酸探针。此法可标记单链或双链DNA或RNA，及寡核苷酸。灵敏度与放射性探针相当。标记方法：取DNA或片段...
...上述各种方法制备酶标抗体时，除产生酶标抗体外，还有未标记的抗体蛋白、游离酶、酶二聚体及偶联剂等。这些均可使酶标抗体的敏感性下降，故酶标抗体须经纯化后应用。现简介几种常用的纯化方法。1．多聚体的分离实验中，不同的试剂形成的多聚体的数量各异，...
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