原位杂交组织(或细胞)化学技术简称原位杂交(In situhybridization),如上所述,属于固相核酸分子杂交的范畴。但它区别于固相核酸分子杂交中的任何一种核酸分子杂交技术。菌落杂交系细菌裂解释放出DNA,然后进行杂交。Southern印迹杂交法是以鉴定DNA中某一特定的基因片段,而Norhtern印迹杂交法是用以检测某一特定的RNA片段的。它们都只...
自旋标记 spin label 自旋标记 spin label 很多物质的 分子 不表现 电子自旋共振 (ESR),但对这些分子,人工地使之与 自由基 (free radical)结合从而得以用ESR法来研究,获得独特的ESR信息,这就是 自旋标记法 。因自由基有不成对电子自旋,所以称自旋标记(H.M.McConnell)。开始是用 氯丙嗪 阳离子自由基研究...
一、质粒DNA的提取及鉴定
...糖胺聚糖)与核心蛋白质构成的共价化合物。其中氨基聚糖可分为透明质酸、硫酸软骨素、硫酸皮肤素、硫 酸角 质素、肝素和硫酸乙酰肝素等。 真皮纤维化是以胶原为主的细胞外基质成分在真皮中过度 积聚 的结果。它既见于 硬皮病 等皮肤病中,还见于皮肤 创伤 愈合过程中发生的肥厚性瘢痕和 瘢痕疙瘩 中。现将免疫细胞化学技术在上述常见的真皮纤维化性疾病研究中的应用简介如下:
核酸分子探针的制备首先需要获得所要的特异性核酸或其片段。可用以下方法制备: (1)直接分离基因核酸:即从基因组上直接用内切酶切下所需基因。 (2)化学合成基因核酸:即以单核苷酸为原料,以固相磷酸三酯法合成某一结构完全清楚,分子量较小的寡核苷核。 (3)酶促合成核酸:在真核细胞中获得特异的结构基因。常用方法是以mRNA为模板,利用逆转录酶合成单链cDNA,再以...
由于酶标抗体存在一些缺点,例如①酶与抗体间的共价连结可损害部分抗体和酶的活性;②抗血清中的非特异性抗体被酶标记后,与组织成分结合,可致背景染色等。为此Sternberger等在酶标法的基础上,发展了非标记抗体酶法。包括酶桥法(Enzyme Bridge Method)和过氧化物酶抗过氧化物酶法(PeroxidaseAntiperoxidase Method,...
标记基因 原本是 基因工程 的专属名词,但是现在它已经成为一种基本的实验工具,广泛应用于 分子 生物学 、 细胞生物学 、发育生物学等方面的研究。 标记基因是一种已知功能或已知序列的 基因 ,能够起着特异性标记的作用。在基因工程意义上来说,它是 重组 DNA载体的重要标记,通常用来检验转化成功与否;在 基因定位 意义上来说,它是对目的基因进行标志的工具,通常...
发光免疫技术是将发光系统与免疫反应相结合,以检测抗原或抗体的方法。其既具有免疫反应的特异性,更兼有发光反应的高敏感性,在免疫学检验中应用日趋广泛。
最常用的同位素是α- 32 PdNTP, 3 HdNTP,及 35 SdNTP,多用缺品平移法、末端标记法,随机引物延伸法和反转录标记法。在以mRNA制备cDNA时,同时掺入标记的脱氧核苷酸,制出cD-NA标记探针。
如前所述,若我们把角蛋白视为上皮性肿瘤的共性免疫标记物,则对不同器官的上皮性肿瘤具有特别或优先识别作用的标记物,可看作为器官特异性或相对特异性标记物。经过长期实践的检验,一些上皮器官特异性标记物已为人们所接受。此外,也发出了一些效果较肯定、特异性较好、诊断作用较明确的新的标记物。现将其生物化学本质、肿瘤表达情况及诊断应用附表如下(表12-5),并将其在上皮组...
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