...记方法不同。通常，对于5’磷酸化的DNA探针，要先用碱性磷酸酶去掉磷酸基团，然后再用于PNK催化的5’末端标记，这样标记效率较高。 4．随机引物延伸 这是以单链DNA或RNA模板合成高比活性32P标记探针所选用的方法。原理是使长6～8nt的寡核苷酸片段与变性的DNA或RNA模板退火，在DNA聚合酶I或反转录酶的作用下，以每一个退火到模板上的寡核苷酸片段为引物...
ApoB基因多态性研究较多的有RFLP、VNTR、SP多态性，分别叙述如下： 1．RFLP的检测 ApoB有10种RFLP，一般采用PCR-RPLPs方法进行分析，研究较多的有第26外显子XbaⅠ、MspⅠ位点，第29外显子EcoRⅠ位点，在Apob DNA上的位置如图19-6，图19-7所示： 图19-6 ApoB基因部分RFLP S 示意图 图19-6 ...
...的发展，各种新的鉴别方法亦纷纷推出，如红外光谱鉴别、化学指纹图谱鉴别以及DNA分子标记鉴别等，中药材鉴别领域显示出了蓬勃的生机。 近年来，以PCR为基础的DNA分子标记鉴别技术在中药材真伪鉴别中发挥了重要的作用，同时，在多基源品种的鉴别及道地药材鉴别中也崭露头角，显示出了巨大的前景。以 人参 、 西洋参 的分子标记鉴别研究为例，可以清楚地看出中药材分子标记鉴...
...lymorphism,RFLP）。一定的 内切酶 组合所得到的HLA-RFLP可以和传统方法测定的HLA特异性型别相关。80年代末发展起来的PCR（polymerase chain reaction）技术已被用于RFLP分析，即用等位特异 限制酶 裂解PCR 扩增 的片段，然后再进行分析，从而大提高了灵敏度。 （二）PCR/SSO技术 此法乃用人工合成的HL...
...polymorphism,RFLP）。一定的内切酶组合所得到的HLA-RFLP可以和传统方法测定的HLA特异性型别相关。80年代末发展起来的PCR（polymerase chain reaction）技术已被用于RFLP分析，即用等位特异限制酶裂解PCR扩增的片段，然后再进行分析，从而大提高了灵敏度。 （二）PCR/SSO技术 此法乃用人工合成的HLA型别特...
...多，其缺点是不够敏感，因此，需要一种快速、可靠，具有高度敏感性的检测方法。聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）用于检测Hp感染国外已有报道，国内也有人用此方法检测唾液中的Hp。本文报道了用PCR技术从胃粘膜活组织中检测Hp，并探讨该方法在Hp感染的诊断和在评价治疗后根除效果中的意义。 1 材料和方法 1.1 PCR方法的...
...多，其缺点是不够敏感，因此，需要一种快速、可靠，具有高度敏感性的检测方法。聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）用于检测Hp感染国外已有报道，国内也有人用此方法检测唾液中的Hp。本文报道了用PCR技术从胃粘膜活组织中检测Hp，并探讨该方法在Hp感染的诊断和在评价治疗后根除效果中的意义。 1 材料和方法 1.1 PCR方法的...
...多，其缺点是不够敏感，因此，需要一种快速、可靠，具有高度敏感性的检测方法。聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）用于检测Hp感染国外已有报道，国内也有人用此方法检测唾液中的Hp。本文报道了用PCR技术从胃粘膜活组织中检测Hp，并探讨该方法在Hp感染的诊断和在评价治疗后根除效果中的意义。 1 材料和方法 1.1 PCR方法的...
...具有几种功能：一是聚合作用，以DNA为模板，将dNTP中的脱氧单核苷酸逐个加到3-OH末端。二是有’3’→5’外切酶活力，能识别和消除错配的引物末端，与复制过程中校正功能有关。三是5’→3’外切酶活力，它能从5’端水解核苷酸，还能经过几个核苷酸起作用，切除错配的核苷酸。1985年Mullis 等发明了PCR方法，以Klenow片段完成β-珠蛋白的PCR后，世...
...定的循环周期后需扩增的片段不再按指数增多而逐渐进入平坡；进入平坡的循环次数，取决于起始时存在的模板拷贝数以及合成的DNA总量。所谓平坡就是批PCR循环的后期，合成产物达0.3～1pmol时，由于产物的堆积，使原来以指数增加的速率变成平坦的曲线。 造成PCR进入平坡的原因有：引物和dNTP等消耗完毕、Taq酶失活，这几中因素在标准反应中均不会出现。此外，还有几...
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