...标记的探针杂交,再与包被在葡聚糖珠上的另一互补寡核苷酸(与标记探针互补的位置不同)杂交、检测。该方法同一般杂交检测技术相比,特异性要高出许多。TAS主要特点是扩增效率极高,由于拷贝数是以10指数递增,只有6个循环,靶序列即能达到2×106个...
...FCM在免疫应用中的技术问题。(1)免疫应用的激发光源和滤片系统:适用于免疫技术的FCM的激发光是氪离子气体激光器,光谱中波长为531nm和856nm的谱线最强。为了扩大仪器对双标记或三标记染色的荧光信号的分辨范围可使用双激光光源。为了减少...
...上的应用可以从核酸及其功能活动水平上,在细胞或组织的原位显示有助于诊断或研究的信息。目前常使用乙型肝炎病毒(HBV)的DNA标记后作为探针,研究乙肝病毒相关性肾炎肾组织中HBV-DNA之存在状态。2.光学显微镜观察及摄影技术由于免疫酶标技术...
...液10μl于切片上,盖上22×22mm的硅化盖片或相当大小看蜡膜,3H标记探针每10μl杂交液含1×105cpm探针,32P或35S标记探针每10μl杂交液含5×105cpm探针;如是漂浮切片,则用灭菌吸水纸将切片水份尽量吸干,然后入杂交液...
...绝大多数情况下,关于由凝集素所识别的碳水化合物决定簇的种类,关于携带决定簇的分子的性质和机能,完全凭实验经验去发现。1.作为细胞分化和成熟的标记 应用凝集素作为细胞分化的标志,在这方面的应用报告最多,而且研究比较集中于血细胞,特别是淋巴细胞...
...细胞杂交体中提取的DNA。如果人体某种载脂蛋白cDNA或基因DNA探针仅与含有特定人体染色体的体细胞杂交体DNA杂交,且不与同一杂交体内非人体染色体DNA交叉反应,这种载脂蛋白基因的染色体定位便可初步确立。荧光标记原位杂交法使用荧光素标记的...
...32P]dCTp 1.5×106Bq,dATp 、dGTP和dTTP各200μmol/L。标记反应包括3个步骤:(1)变性:反应管在95℃水浴5min,然后离心;(2)退火:37℃水浴2min;(3)延伸:加入DNA聚合酶i 1u,37℃水浴...
...优点,目前在放射免疫分析中,使用放射性碘标记物最多。从应用角度来看,131I和125I又各有其优缺点,可根据实验的要求、仪器的条件和放射性碘制剂的规格等条件合理选用。但相对而言,125I有较多的优点,一是半衰期适中,允许标记化合物的商品化及...
...用于软组织肿瘤可在石蜡切片表达的抗体已有多种,请参见表12-1。表12-1 软组织细胞可用的标记抗体抗原名称标记细胞(1)角蛋白(Keratin)上皮与肌上皮细胞(2)波纹蛋(Vimentin)间叶分化细胞、内皮细胞(3)结蛋白(...
...析法:它对分离纯化标记化合物及鉴定标记化合物的放化纯度都有很大潜力,具有分析速度快、分离效率高、适用范围广等特点(几乎80%的有机化合物均可应用)。关键是要选择合适的固定相和流动相,使产品与杂质分离。在流动相中,被分析物各组份的浓度变化可用...
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