...引物A、B,引物A与待检RNA3’端互补,并有一T7RNA多聚酶的识别结合位点。逆转录酶以A为起点合成cDNA;引物B与此cDNA3’端互补,逆转录酶同时还具有RnaseH和DNA多聚酶的活性,又可利用引物B合成cDNA的第二链。RNA多聚酶...
...点样于膜上,每个样品一般点5μl(2~10μg DNA)。④将膜烘干,密封保存备用。(2)RNA斑点杂交:与上法类似,每个样品至多加10μg总RNA(经酚/氯仿或异硫氰酸胍提取纯化),方法是将RNA溶于5μl DEPC水,加5μl甲醛/SSC...
...primary RNA转录本中加工为 μmRNA和εmRNA(或其它重链mRNA),同时表达IgM、IgE或其它类Ig。图3-7 Ig类型转换缺失模型(三)膜表面Ig重链基因膜表面Ig(mIg)重链基因的外显子结构与分泌性Ig重链的基因外显子结构...
...RNA分子也是由核苷酸依3’,5’磷酸二酯键形成的多核苷酸链。RNA总是以单链的形式存在,也有5’磷末端及3’羟基末端。RNA单链的局部折叠成的某一片段的A及G分别与另一片段的U及C配对常形成发夹结构(hairpin structure)...
...和大小(nm)核酸类型核衣壳形成部位血凝素神经氨酸酶溶血作用融细胞作用包涵体形成鸡胚中生成多形性80~120单股负链RNA,分节段细胞核内有有无无无良好多形性150~300单股负链RNA、不分节段细胞浆内有多数没有有有浆内多数不佳...
...包括:单个碱基替代,密码子的缺失与插入,移码突变,终止密码突变,融合突变(编码两条不同肽链的基因发生重排而形成融合基因)。可通过DNA检 测分析和RNA检测分析进行诊断。 1.DNA检测与分析 2.RNA检测与分析 直接测定异常血红蛋白病人...
...脱蜡经梯度酒精入水。一般不提倡浸入二甲苯溶液。但在细胞内mRNA含量高时应用二甲苯脱蜡后仍能显示。经水洗后入37℃烤箱4h或过夜,然后进行杂交前处理。在烘烤及低温保存时,为防尘埃及空气中RNA酶的污染,宜用锡箔纸(foilpaper)包被,内...
...放线菌素D(dactinomycin,DACT)是多肽抗生素,国产品称更生霉素。【药理作用】放线菌素D能嵌入到DNA双螺旋链中相邻的鸟嘌呤和胞嘧啶(G-C)碱基对之间,与DNA结合成复合体,阻碍RNA多聚酶的功能,阻止RNA特别是mRNA...
...遗传信息传给子代的同时,提出了RNA在遗传信息传到蛋白质过程中起着中介作用的假说。1958年Weiss及Hurwitz等发现依赖于DNA的RNA聚合酶;1961年Hall和Spiege-lman用RNA-DNA杂增色证明mRNA与DNA序列...
...直径数微米(如人细胞核的直径为6-7μm)的细胞核中。图15-12B DNA的高级结构-从核小体至染色体核小体的形成以及DNA超螺旋结构与功能的关系还不十分清楚,可能与基因的转录调节控制有关。...
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