胶体金标记物制备_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

胶体金标记蛋白质原理,一般认为是由于pH值等于或稍偏碱于蛋白质等电点时,蛋白质呈电中性,此时蛋白质分子与胶体金颗粒相互间的静电作用较小,但蛋白质分子的表面张力却最大,处于一种微弱的水化状态,较易吸附于金颗粒的表面,由于蛋白质分子牢固地结合在金颗粒的表面,形成一个蛋白层,阻止了胶体金颗粒的相互接触,而使胶体金处于稳定状态,如果=低于蛋白质的等电点时,蛋白质带...

http://qihuangzhishu.com/969/131.htm

真核细胞基因组DNA制备_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

从不同组织细胞或血细胞中提取DNA是进行基因诊断先决条件。制备DNA的原则是既要将蛋白质、脂类、糖类等物质分离干净,又要保持DNA分子的完整。蛋白酶K的应用使这两个原则得到了保证。在提取DNA的反应体系中,SDS是离子型表面活性剂,主要作用是:(1)溶解膜蛋白而不破坏细胞膜;(2)解聚细胞中的核蛋白;(3)与蛋白质结合,使蛋白质变性而沉淀下来。蛋白酶K可将...

http://qihuangzhishu.com/969/647.htm

单克隆抗体制备_《免疫学和免疫学检验》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

1975年Kǒhler和Milstein首先报道用细胞杂交技术使经绵羊红细胞(SRBC)免疫小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合,建立起第一个B细胞杂交瘤细胞株,并成功地制得抗SRBC的单克隆抗体(monlclonalantibody,McAb)。迄今世界已研制成数以千计的McAb。 单克隆抗体的理化性状高度均一,生物活性单一,与抗原结合的特异性强,便于人为处理和质...

http://qihuangzhishu.com/1016/91.htm

免疫金特性和制备_《免疫学和免疫学检验》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...相附。因此环境pH和离子强度是影响吸附主要因素,其他如胶体金颗粒的大小、蛋白质的分子量及蛋白质浓度等也会影响蛋白质的吸附。 (二)免疫金的制备 1.用0.2mol/LK 2 CO 3 或0.1mol/LHC1调节胶体金溶液的pH至选定值。原则上可选择待标记蛋白质等电点,也可略为偏碱。但通常最适反应pH往往需经多次试验才能确定。 在调节胶体金的pH值时应注意...

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六经标本

六经标本 , 经络 部位名。指手足 六经 标部和本部。亦称 十二经标本 。标指末梢,为 经气 所止;本指根本,为经气所起。《 灵枢 . 卫气 》:“能知六经标本者,可以无惑于天下。”十二经各有 标本 ,以四肢肘膝以下某些部(穴)位为本,头、面、胸、背的某些部(穴)位为标。其分布部位与 根结 相仿,但联系范围较广,用以说明 经脉 在四肢(本)与头、面、胸、背...

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制备单克隆抗体基本技术_《免疫学和免疫学检验》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

制备单克隆抗体是复杂而费时工作,整个技术流程如图11-2。 (一)抗原提纯与动物免疫 对抗原的要求是纯度越高越好,尤其是初次免疫所用的抗原。如为细胞抗原,可取1×10 7 个细胞作腹腔免疫。可溶性抗原需加完全福氏佐剂并经充分乳化,如为聚丙烯酰胺电泳纯化的抗原,可将抗原所在的电泳条带切下,研磨后直接用以动物免疫。 选择与所用骨髓瘤细胞同源的BALB/c健康小...

http://qihuangzhishu.com/1016/93.htm

特异性目核酸(或基因)的制备_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

核酸分子探针制备首先需要获得所要的特异性核酸或其片段。可用以下方法制备: (1)直接分离基因核酸:即从基因组上直接用内切酶切下所需基因。 (2)化学合成基因核酸:即以单核苷酸为原料,以固相磷酸三酯法合成某一结构完全清楚,分子量较小的寡核苷核。 (3)酶促合成核酸:在真核细胞中获得特异的结构基因。常用方法是以mRNA为模板,利用逆转录酶合成单链cDNA,再以...

http://qihuangzhishu.com/969/510.htm

伤寒标本

伤寒标本 ,病证名。指 伤寒 本证、标证及其受病先后次序。明. 陶华 《伤寒家秘的本》卷二:“标者,病之梢末,本者,病之根本。先受病为本,次受病为标……”故名。

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大肠杆菌感受态细胞制备和转化_《动脉粥样硬化》_中医内科书籍_【岐黄之术】

...Higa(1970)发现为基础,其基本方法是用冰预冷的CaCl 2 或多种2价阳离子等处理细菌,使之进入感受态得以转化。 用CaCl 2 制备新鲜或冷冻的大肠杆菌感受态细胞,常用于成批制备感受态细菌。本法适用于大多数大肠杆菌菌株,且迅速、重复性好。操作过程简述如下。 1.从37℃培养16~20h的新鲜平板中挑取一个单菌落(如大肠杆菌DH52),或1ml新鲜...

http://qihuangzhishu.com/995/273.htm

临床生物化学/标本正确收集和保存

正确地收集、运送和保存 标本 是十分重要环节,不恰当的标本收集与保存,往往是导致实验结果不可靠的主要原因,且又往往不易被检测者发现,因而必须予以重视。 ⒈标本收集前应考虑的因素 包括病人的饮食、药物与采集的时间等。有些 化学 组成容易受到饮食成分的干扰,有时还可受到近期食谱的影响。许多药物可干扰测定结果,应加以注明,并尽可能在试验前停药。有些药物可能对某一...

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