...要点及其与DNA生物学功能的关系。3.原核生物与真核生物在基因组结构上有何不同?4.什么是限制性片段长度多态性?5.简述两种DNA序列测定方法的基本原理。6.试述DNA结构的不均一性与其生物学功能的关系。7.什么是核酸变性?简述影响特定核酸...
...CMVDNA为线性双链分子,约235-240kb,长度为56-76nm,其分子量为150-160×103KDa,不同种属的CMv DNA分子量基本相同。各毒株DNA有80%同源序列,通过限制性酶谱可区分不同毒株。CMV与其他疱疹病毒一样,...
...DNA的两条多苷酸链中只有其中一条链作为模板,这条链叫做模板链(templatestrand),又叫做无意义链。DNA双链中另一条不做为模板的链叫做编码链,又叫做有意义链,编码链的的序列与转录本RNA的序列相同,只是在编码链上的T在转录本RNA...
...动物中的应用成为可能而且近来取得长足发展。基因打靶是指外源DNA片段上带有与受体细胞染色体相应部位的同源序列,导入ES细胞后在同源部位发生定点整合,这种整合是通过同源重组的方式来实现的。Piedrahita等(1992)应用此技术已成功地筛选...
...DNA段落中胞嘧啶甲基化程度常较低。这种甲基化最常发生在某些基因5′侧区的CpG序列中,实验表明这段序列甲基化可使其后的基因不能转录,甲基化可能阻碍转录因子与DNA特定部位的结合从而影响转录。如果用基因打靶的方法除去主要的DNA甲基化酶,小鼠...
...如果目的序列两端有与载体上相同的限制性核酸内切酶位点,则同一限制酶切开产生的粘末端,在降低温度退火时,能重新互补结合,在DNA连接酶催化下,目的序列就与载体DNA链相连接(见图20-5)。图20-5 同一限制酶切割DNA粘性末端的连接不同...
...动物中的应用成为可能而且近来取得长足发展。基因打靶是指外源DNA片段上带有与受体细胞染色体相应部位的同源序列,导入ES细胞后在同源部位发生定点整合,这种整合是通过同源重组的方式来实现的。Piedrahita等(1992)应用此技术已成功地筛选...
...基因文库中筛选所需要的基因进行cDNA克隆,测定其核苷酸序列,然后从核苷酸序列推断蛋白质氨基酸序列。目前,已分离出许多与动脉粥样硬化有关的脂蛋白的cDNA克隆,并将其蛋白质一级结构的氨基酸排列顺序和基因的核苷酸顺序测出。现已查明,ApoAⅠ、AⅣ...
...要扩增模板DNA,首先要设计两条寡核苷酸引物,所谓引物,实际上就是两段与待扩增靶DNA序列互补的寡核苷酸片段,两引物间距离决定扩增片段的长度,两引物的5’端决定扩增产物的两个5’末端位置。由此可见,引物是决定PCR扩增片段长度、位置和结果...
...如下引物:①针对IgH CDR-Ⅲ区域、Ⅴ区和J区的共同保守序列的引物A和B,引物序列:A:5′-ACACGGCCGTGTATTACTGT-3′;B:5′-ACTCTAGAGGAGACGGTGACC-3′。②针对TCRδ基因重排所产生的DNA...
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