1978年Collins和Hohn构建一种新型的大肠杆菌克隆载体，命名为cosmid（柯斯质粒）。它是用正常的质粒同噬菌体λ的cos位点构成。例如，柯斯质粒pHC79系由质粒pBR322和噬菌体λ的cos位点的一段DNA构成（图23-5），全长43.kb。在包装时，cos位点打开而产生噬菌体λ的粘性末端。由于pHC79有pBR322DNA，所以也就有氨苄青霉...
...义的。克隆的基因只有通过表达才能探索和研究基因的功能以及基因表达调控的机理，克隆基因表达出所编码的蛋白质可供作结构与功能的研究。有些具有特定生物活性的蛋白质在医学上、以至在工业上都是很有应用价值的，可以克隆其基因使之在宿主细胞中大量表达而获得。要使克隆基因在宿主细胞中表达，就要将它放入带有基因表达所需要的各种组件的载体中，这种载体就称为表达载体（expres...
一、 细菌 染色体 细菌作为 原核 型 微生物 ，虽没有完整的核结构，但却有核区（或 核质 ）。在电镜下观察，核区有盘旋堆积的 DNA 纤维 。自大 肠杆菌 提取的DNA是一条完整的DNA链， 分子量 为2.4×109daltons,仅为人体胞DNA量的0.1%。 细胞 的DNA含量决定存在的 基因 数。如按每个基因由平均为1000个 碱基对 估计， 大肠杆...
...义的。克隆的基因只有通过表达才能探索和研究基因的功能以及基因表达调控的机理，克隆基因表达出所编码的蛋白质可供作结构与功能的研究。有些具有特定生物活性的蛋白质在医学上、以至在工业上都是很有应用价值的，可以克隆其基因使之在宿主细胞中大量表达而获得。要使克隆基因在宿主细胞中表达，就要将它放入带有基因表达所需要的各种组件的载体中，这种载体就称为表达载体（expres...
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...这样的DNA单位称为 复制子 或复制单元(replicon)。在 原核细胞 中，每个DNA分子只有一个复制起始点，因而只有一个复制子，而在 真核生物 中，DNA的复制是从许多起始点同时开始的，所以每个DNA分子上有许多个复制子。 DNA复制起始点有结构上的特殊性，例如： 大肠杆菌 染色体 DNA复制起始点Oric由422个 核苷酸 组成，是一系列对称排列的 ...
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应用的最广泛的质粒载体是pBR322，它属松弛型质粒，有抗氨苄青霉素和抗四环素两个抗性基因可作为标记基因，有许多种常用的限制酶的切点。它全长4352个核苷酸，排列顺序已全部测定，基本结构如图23-3。 当需要用pBR322来克隆BamHI酶切的一个DNA片段时，一般的做法是如图23-4所示。 图23-4 pBR322克隆DNA片段的程序 从图23-4可见，外...
脱氧核糖核酸 ( DNA )是生物界遗传的主要物质基础。 生物 有机体的遗传特征以密码(code)的形式编码在DNA 分子 上，表现为特定的 核苷酸 排列顺序-即 遗传信息 ，在 细胞 分裂前通过DNA的复制(Replication)，将遗传信息由 亲代 传递给 子代 ，在后代的 个体发育 过程中，遗传信息自DNA 转录 (Transcription)给 R...
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