为了得到更明确的染色结果，在用IGS方法定位细胞抗原时可采用搭桥法，使IGS得到放大，这里介绍一种用抗A蛋白抗体作桥的PAG放大法。下面以5-羟色胺定位为例说明这一新方法。 （1）石蜡切片→脱蜡至水。 （2）1%胰蛋白酶消化10min或3mon/L尿素消化30min。 （3）0.05mol/l pH7.4 TBS振洗5＇×2。 （4）1%EA封闭组织10mi...
核酸 分解的第一步是水解 核苷酸 之间的 磷酸二酯键 ，在高等动植物中都有作用于磷酸二酯键的 核酸酶 。不同来源的核酸酶，其 专一性 、作用方式都有所不同。有些核酸酶只能作用于RNA，称为 核糖核酸酶 （RNase），有些核酸酶只能作用于DNA，称为 脱氧核糖核酸酶 （DNase），有些核酸酶专一性较低，既能作用于RNA也能作用于DNA，因此统称为核酸酶（n...
...（如甘氨酸），使过量标记酯消耗掉以终止反应。 此法避免了蛋白质与氧化剂的接触，又避免了与放射性碘原子的直接接触，可防止碘源中有害物质对蛋白质的损伤，适用于标记缺乏酪氨酸的蛋白质或酪氨酸在活性中心，引入碘原子后会引起蛋白质的失活。其缺点是标记技术比较复杂，需要接触较多的放射性，经二步反应，碘标记率比较低。一般认为此法不宜标记短肽，而适于分子量大于1万的蛋白质。
...银也可定位，微镜则更有助于定位。在暗视野前景下，金银粒呈金黄色闪光颗粒，即使微量金银也可定位。 （11）铀—铅电镜染色，电镜观察。 免疫金银法敏感度高，金银颗粒电子密度高，反差强；应用包埋前染色可先定位阳性反应部位再作电镜超薄切片，获得阳性反应机率高，特别适用于含微量抗原的部位，如突触等。其不足是须经暗室显影，手续较烦杂，包埋前免疫染色易增加非特异性染色。另...
除游离荧光素可用2×46cm柱层析法，详细方法参阅第二章 。加入荧光抗体15～18ml（按床体积的5%～10%加样），使其缓慢渗入柱内，待即将全部入柱时，加入PBS少许，关闭下口，停留30～40min ，使游离荧光充分进入细筛孔中，然后再接通洗脱瓶开始滴入洗脱液。加入洗脱液一定量后，荧光抗体即向下移行，逐渐与存留于上端的游离荧光素之间拉开明显的界线，随着大量...
分子病 （molecular disease）由于遗传上的原因而造成的 蛋白质 分子结构或合成量的异常所引起的 疾病 。蛋白质 分子 是由 基因 编码的，即由 脱氧核糖核酸 （DNA）分子上的 碱基顺序 决定的。如果DNA分子的 碱基 种类或顺序发生变化，那么由它所编码的蛋白质分子的结构就发生相应的变化，严重的蛋白质分子异常可导致疾病的发生。实际上任何由遗传...
...异性中、灵敏度高、方法简便和背景染色淡等优点。蛋白A的免疫特异性在第五章 已作了介绍，PAg复合物制备方法简便，作为第二抗体，无种属特异性，可以免去不同种属动物要制备不同的特异性免疫球蛋白。PAg 复合物与包埋剂和细胞成分都极少发生非特异性的交互作用，蛋白A和金粒间非共价的结合特性既不影响蛋白A的活性，又能保持高度的稳定性，PAg复合物分子最小易于穿透组织。
在 分子 水平上提供一种 纯化 和 扩增 特定DNA片段的方法。常含有目的 基因 ，用体外 重组 方法将它们插入 克隆载体 ，形成重组克隆载体，通过转化与 转导 的方式，引入适合的寄主体内得到复制与扩增，然后再从筛选的寄主细胞内分离提纯所需的克隆载体，可以得到插入DNA的许多拷贝，从而获得目的基因的扩增。 克隆(clone,clon)一词源于希腊文Klon，...
肽核酸结构。 肽核酸 （ Peptide nucleic acid ； PNA ）是一种与 DNA 和 RNA 相似的 化学 物质，可经由人工合成制造，用来作为 生物学 研究或是医学治疗。地球上已知的生物并未发现任何体内拥有PNA的个体。 PNA的骨架是由重复排列的N-2-(氨乙基)- 甘氨酸 （N-(2-aminoethyl)-glycine）单位，经由 ...
锁核酸 （ Locked nucleic acid ， LNA ）是一种经过修饰的 RNA ，LNA中一部分 核糖 上的2'与4'碳连结在一起。一般可见于A- DNA 或RNA。 这类 核酸 可以增加 引子 或 探针 （probe）的 融解 温度（Tm值），加强这些实验用物质的稳定性，可应用在即时 聚合酶连锁反应 （real-time PCR）等技术中。 参...
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