...等用斑点杂交法评价了同位素与非同位素标记Hp全基因探针的实用性。Mortomi等通过DNA-RNA杂交方法，用人工合成的Hp特异性寡核苷酸探针，同16SrRNA序列互补，证实这种探针比较敏感，可以检出少至5000个～10000个Hp。近年来...
...平称并在平移过程中形成标记的新生核酸链。此法也适用于探针的非放射性标记。如32P标记DNA探针（缺口平移法）：反应体积为25μl，内含0.3μgDNA片段，4μl 0.2μmol/L dNTP, 1.1×106Bq [α-32P]dATP,...
...足以合成25μg/DNA。购自厂商的dNTP溶液一般均未调pH，应用1mol/l NaOH将dNTP贮存液pH调至7.0，以保证反应的pH值不低于7.1。市购的游离核苷酸冻干粉，溶解后要用NaOH中和，再用紫外分光光度计定量。（三）引物的量...
...用限制性内切酶水解，进一步确定扩增产物的特异性。（二）分子杂交分析分子杂交既是检测PCR产物特异性的一种较好的方法，也是检测扩增产物的非限制性内切酶位点上碱基突变的有效方法。分子杂交法是根据标记探针与两条引物链之间特异DNA片段的互补性进行...
...repetitive sequence)，所得到的Cot曲线更为复杂。图15－9 不同物种核酸的Cot曲线DNA的变性和复性原理，现已在医学和生命科学上得到广泛的应用。如核酸杂交与探针技术，聚合酶链反应(polymerasechain ...
...FCM对染色体进行分类、纯化，检测或定量测量细胞表面或内部由特异基本所编码的成份。这方面的成果已用在畜类性别的预选择，以及对人类计划生育等方面的工作。2．在免疫学方面的应用 FCM以它的快速、灵活及定量的特点被广泛地应用于免疫学的基础研究和临床...
...DNA切开，电泳分离，再变性，印迹到硝酸纤维（Nc）滤膜上，用探针进行杂交，检测DNA的方法。自显影或显色用于DNA分析。以32P标记放射性探针为例，放射自显影观察结果。（图18-6）。图18-6 Southernblot体系前述分离、纯化的...
...特定的RNA互补的cDNA提供了一条极为有利和有效的途径。RNA扩增包括两个步骤：①在单引物的介导下和逆转录酶的催化下，合成RNA的互补链cDNA；②加热后cDNA与RNA链解离，然后与另一引物退火，并由DNA聚合酶催化引物延伸生成双链靶...
...)—PCR。它的原理是采用随机选出的单一核苷酸链为引物以靶DNA模板在多个部位引导扩增DNA。经过RADP技术处理的结果可显示出不同Hp株的特异性。因此亦有人把此方法用于Hp的流行病学研究上。随着分子生物学技术的不断发展，PCR技术的应用在...
...后的Hp染色体DNA，经过琼脂糖电脉按大小分离所得的片段，来比较各株细菌的基因组DNA酶切图型。Langenberg等报道了用HindⅢ限制性内切酶分析Hp的全基因差异。Wetherall等用斑点杂交法评价了同位素与非同位素标记Hp全基因...
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