为了体外研究脂蛋白的细胞代谢和脂蛋白受体活性，早在1974年Goldstein和Brown就建立了成纤维细胞125I标记LDL的配体-受体结合分析法。其基本原理是：用放射性同位素（常用125I）标记LDL后，与细胞（通常为培养的单层成纤维细胞）、组织或含有LDL-R的制剂一起孵育，使LDL-R与125I-LDL充分结合，形成受体-配体复合物，再除去未结合的1...
金标法是Faulk和Taylor（1971）提出的，并首先用于免疫电镜。它是利用胶体金在碱性环境中带有负电的性质，使其与抗体相吸附，从而将抗体标记。当用金标记的抗体与抗原反应时，在光镜水平胶金液呈现鲜艳的樱红色，不需加外进行染色。在电镜水平，金颗粒具有很高的电子密度，清晰可辨。因此，免疫电镜胶体金标记法近年来被成功地应用于生物学的各个方面，并取得了要喜的进展...
眼科常用药物 (drugs commonly used in ophthalmology)， 眼科 药物治疗是全身 药物疗法 的一部分，眼病的恢复同全身状态有密切关系。全身给药后药物到达眼部 血管 及组织内的浓度与 血液 中的 药物浓度 成一定的比例，而 眼球 的屈光间质和眼球壁 毛细血管 之间，形成了血－ 房水 屏障，这使药物经全身给药途径后，在眼内不易达...
“抗中性粒细胞抗体”(ANGA)通常指 中性粒细胞减少症 患者血清中的抗体以及抗中性粒细胞膜成分抗体，这些自身抗体与“抗中性粒细胞胞浆抗体”(ANCA)不同。测定ANGA可以协助诊断临床上各种引起 粒细胞减少 的疾病。 常用的有间接免疫荧光法与ELISA： 1、间接免疫荧光法实验原理： 将荧光素标记在相应的抗体上，直接与相应抗原反应。 第一步，用未知未标记的...
“抗中性粒细胞抗体”(ANGA)通常指 中性粒细胞减少症 患者血清中的抗体以及抗中性粒细胞膜成分抗体，这些自身抗体与“抗中性粒细胞胞浆抗体”(ANCA)不同。测定ANGA可以协助诊断临床上各种引起 粒细胞减少 的疾病。 常用的有间接免疫荧光法与ELISA： 1、间接免疫荧光法实验原理： 将荧光素标记在相应的抗体上，直接与相应抗原反应。 第一步，用未知未标记的...
放射性标记核酸探针在使用中的限制，促使非放射性标记核酸探针的研制迅速发展，在许多方面已代替放射性标记，推动分子杂交技术的广泛应用。目前已形成两大类非放射标记核酸技术，即酶促反应标记法和化学修饰标记法。 酶促反应标记探针是用缺口平移法，随机引物法或末端加尾法等把修饰的核苷酸如生物素-11-dUTP掺入到探针DNA中，制成标记探针，敏感度高于化学修饰法，但操作程...
...链以碱基配对规则的一种结合方式，是核酸的重要理化特性。利用分子杂交这一特性来对特定核酸序列进行检测，必须将杂交链中的一条用某种可以检测的进行标记，这条链就称为核酸探针。因此，核酸探针的制备是分子杂交技术的关键。放射性同位素标记是最早采用的也是目前最常用的核酸探针标记方法。常用的放射性同位素有32P和35S。32P因其能量高，信号强，所以最常用。放射性同位素标...
以生物素标记抗体作第一抗体，酶标记抗生物素作为第二抗体（图6-3）。操作步骤如下： 图6-3 LAB技术 （1）切片在含有25～50μg/ml生物素标记抗体（PBS液稀释）中孵育1h，室温。 （2）PBS洗2次，每次5min。 （3）用20～50μg/ml过氧化物酶标记的抗生物素液孵育90min，水洗。 （4）酶呈色反应。 BRAB法和LAB示是Guesdo...
（一）抗体的荧光素标记 用于标记的抗体，要求是高特异性和高亲和力的。所用抗血清中不应含有针对标本中正常组织的抗体。一般需经纯化提取IgG后再作标记。作为标记的荧光素应符合以下要求：①应具有能与蛋白质分子形成共价健的化学基团，与蛋白质结合后不易解离，而未结合的色素及其降解产物易于清除。②荧光效率高，与蛋白质结合后，仍能保持较高的荧光效率。③荧光色泽与背景组织的...
1．光敏生物素标记核酸 目前使用的光标生物素试剂有两种：光生物素（乙酸盐）和 补骨脂 素生物素。它们都是由一个光敏基团、一个连接臂和一个生物素基团组成。光生物素的光敏基团是-N3，它在光作用下可与核酸中的碱基结合。 补骨脂 素生物素中的光敏基团补骨脂素在光照（320～400μm）下，可与单链或双链核酸发生反应，反应主要在T上，C上也有一定程度的反应。光敏生物...
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