...。2.3 于每孔中加0.2ml125I标记HBsAg试液,轻拍反应盘,排出气泡,并使珠子全部浸入液体中,盖上新的密封胶纸,置室温结合4小时(或45℃水浴2小时),去除胶纸,按2.2项冲洗。2.4 用纸试管架将珠子从反应盘转移至塑料管中,其...
...而且G1峰的道数恰好是G2和M峰道数的一半(图10-7)。研究表明:对于正常细胞群,各周期时相的细胞数的比例是同一的;对于恶性病变的细胞群则是非均一的(图10-8)。图10-7 细胞周期的DNA直方图图10-8 细胞周期中的细胞数目与肿瘤的...
...min,将剩余的培养物贮存于4℃。(3)吸尽培养液,使细菌沉淀尽可能干燥。2.碱裂解法小量抽提质粒(1)将细菌沉淀[上述步骤(3)所得]重悬于100μl预冷的溶液Ⅰ(50mmol/L葡萄糖,25mmol/lTris –HCl pH8.0, 10...
...不多的与基因序列互补的DNA片段,称为寡核苷酸探针。2.探针的制备 进行分子突变需要大量的探针拷贝,后者一般是通过分子克隆(molecular cloning)获得的。克隆是指用无性繁殖方法获得同一个体、细胞或分子的大量复制品。当制备基因组...
...存在范德华(Vander Warls)引力,从而进一步稳定了双螺旋结构。4.双螺旋的直径为2nm,每个螺距为3.4nm,内包含10个碱基对,因此每个碱基对距离为0.34 nm。(四)DNA的三级结构DNA三级结构是指双螺旋链作进一步的扭曲构象...
...-10)。图16-10 DNA聚合酶催化的DNA链延长(2)DNA聚合酶的3′→5′外切核酸酶活性:这种酶活性的主要功能是从3′→5′方向识别并切除DNA生长链末端与模板DNA不配对而游离的核苷酸,这种功能称为校对功能,这是保证其聚合作用的...
...(genome)。同一物种的基因组DNA含量总是恒定的,不同物种间基因组大小和复杂程度则差异极大,一般讲,进化程度越高的生物体其基因组构成越大、越复杂,见(表15-2)。表15-2 某些有代表性的生物体内DNA大小分子量碱基对(bp)千...
...石蜡块冰箱保存。组织切片后,37℃温水展平,载片后干燥,装干燥盒置于冰箱,可以保存1周左右。4℃脱蜡和脱二甲苯,PBS洗涤后蒸馏水清洗,风干待染。2.荧光素标记抗体 异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocynate, ...
...相应的多种标记抗体。(2)间接荧光法:可克服直接法需制备多种荧光抗体的复杂操作。将组织或细胞上的抗原直接与相应抗体(不标记荧光)结合,此为第一抗体,再把能与第一抗体特异结合的荧光标记的抗免疫球蛋白抗体加入,此为荧光标记的第二抗体,观察结果与...
...杂交,再用抗地高辛抗血清相连胶体金与之结合,进行细胞或组织特异核苷酸的超威结构定位。为增强金的显示效应,可用银加强法增强金粒的显示效应。(二)基本操作方法(Fischer D et al, 1992)1.组织处理(1)固定:固定剂采用4%...
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