...多,其缺点是不够敏感,因此,需要一种快速、可靠,具有高度敏感性的检测方法。聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)用于检测Hp感染国外已有报道,国内也有人用此方法检测唾液中的Hp。本文报道了用PCR技术从胃粘膜活组织中检测Hp,并探讨该方法在Hp感染的诊断和在评价治疗后根除效果中的意义。 1 材料和方法 1.1 PCR方法的...
高半胱内酯 ( 肝胆疾病辅助用药 ) 适应症 适用于治疗急、慢性肝炎、 肝硬变 、 脂肪肝 、 黄疸 、肝性 昏迷 等。 用量用法 口服:每日2~4g; 静注或肌注:每日200~300mg。 临用时溶于磷酸钠缓冲液内注射。
...交:与上法类似,每个样品至多加10μg总RNA(经酚/氯仿或异硫氰酸胍提取纯化)。方法是将RNA溶于5μlDEPC水,加15μl甲醛/SSC缓冲液(10×SSC中含0.15mol/l甲醛)使RNA变性。然后取5~8μl点样于处理好的滤膜上,烘干。 培养细胞,标本处理技术可以简化,不用提取和纯化RNA。方法是用含0.5%Nonidet P40的低渗缓冲液对多种...
DNA是染色体的主要组成部分,是PCR的扩增模板。要进行PCR,研究DNA结构与功能或者用于诊断目的,首先必须从生物体内提取DNA。DNA往往以核蛋白形式存在,其分子量大(人的染色体DNA平均大小为3.0×10 9 bp),提取DNA应尽量保持DNA完整性和纯度,即在提取中尽量避免机械张力引起的DNA分子降解,又要注意杂质及蛋白的去除,防止胞内酶解DNA。因...
DNA是染色体的主要组成部分,是PCR的扩增模板。要进行PCR,研究DNA结构与功能或者用于诊断目的,首先必须从生物体内提取DNA。DNA往往以核蛋白形式存在,其分子量大(人的染色体DNA平均大小为3.0×10 9 bp),提取DNA应尽量保持DNA完整性和纯度,即在提取中尽量避免机械张力引起的DNA分子降解,又要注意杂质及蛋白的去除,防止胞内酶解DNA。因...
在PCR自动热循环中,最关键的因素是变性与退火的温度。如操作范例所示,其变性、退火、延伸的条件是:94℃60s, 37℃60s, 72℃120s,共25~30个循环,扩增片段500bp。在这里,每一步的时间应从反应混合液达到所要求的温度后开始计算。在自动热循环仪内由混合液原温度变至所要求温度的时间需要30~60s,这一迟滞时间的长短取决于几个因素,包括反应管...
一、免疫PCR
...低于64,抗E不低于16,抗C不低于16,抗c不低于16。 (2)5%受检者红细胞盐水悬液。 (3)1%木瓜酶(或菠萝酶〕溶液:称取木瓜酶1.0克溶解于100毫升pH5.5的磷酸盐缓冲液内。 (4)pH5.5磷酸盐缓冲液由0.067摩尔/升Na2HPO45毫升、0.067摩尔/升KH2PO495毫升混合而成。 (5)已知Rh阳性和阴性的5%红细胞悬液各1份。
...免疫反应同婴儿的抗体反应相区别,因为母亲的IgG可传递给胎儿。另外由于IgG终身存在,所以很难评价治疗结果。血清学诊断常常又存在着假阳性。 PCR检测梅毒螺旋体DNA,特异性很强,敏感性很高,是目前诊断梅毒螺旋体的先进方法。 (一)PCR引物的设计部位与序列: 目前有四套扩增梅毒螺旋体DNA的系统:扩增47KDa膜抗原基因(tpp47基因),扩增39KDa碱...
...儿的 抗体反应 相区别,因为母亲的IgG可传递给 胎儿 。另外由于IgG终身存在,所以很难评价治疗结果。血清学诊断常常又存在着 假阳性 。 PCR检测梅毒螺旋体 DNA ,特异性很强,敏感性很高,是目前诊断梅毒螺旋体的先进方法。 (一)PCR 引物 的设计部位与序列: 目前有四套 扩增 梅毒螺旋体DNA的系统:扩增47KDa膜 抗原 基因 (tpp47基因)...
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