...DNA多聚酶,以探针DNA为模板,合成互补DNA,化学修饰过的dUTP同时掺入到标记的DNA探针中。杂交后用碱性磷酸酶标记的抗地高辛单抗与标记探针DNA中的Dig-dUTP结合,加入显色底物,在碱性磷酸酶作用下,转变成深棕色或蓝色的化合物。...
...虽然一般认为DNA探针敏感度不如cRNA探针,但在病毒的检测等领域中DNA探针仍得到广泛的应用。在原位杂交细胞化学的操作步骤方面与cRNA探针基本相同,所不同的是:(1)杂交时需先在高温80~95℃短时处理,使DNA探针及细胞内靶DNA...
...作用是:(1)溶解膜蛋白而不破坏细胞膜;(2)解聚细胞中的核蛋白;(3)与蛋白质结合,使蛋白质变性而沉淀下来。蛋白酶K可将蛋白降解成小的多肽和氨基酸,使DNA分子尽量完整地分离出来。具体方法如下:(一)白细胞DNA的制备(1)采集外周静脉血...
...,应尽可能一期修复损伤的组织。因为这时解剖关系清楚,继发变性轻微,不仅手术操作容易,而且效果好,功能恢复快。处理顺序是:图3-88 克氏针交叉固定法1.骨、关节的处理。与一般的清创原则一样,尽量保留骨碎片,仅去除完全游离的小骨片。复位后用克...
...(一)基本原理应用DNA探针缺口翻译(nick translation)方法,通过碱基配对以一条DNA链为模板,将生物素标记的某一种脱氧三磷酸核苷酸如Bio-dUTP渗入有缺口的DNA链。将生物素标记的DNA探针与细胞或组织进行原位杂交。...
...交通支。在良好的修复条件下,两种吻合方法效果并无明显差别,一般情况宜行外膜缝合,因其简便易行,无需特殊设备和技能。在神经远侧端有自然分束的部位,宜采用束膜缝合法,对部分神经伤,在分出正常与损伤的神经束后,用束膜缝合法修复损伤的神经束(图3-...
...预后 肝外胆管损伤的病死率与其合并伤的种类有关。合并大血管和神经损伤者病死率高。胆管损伤最大的危险性是胆管损伤的漏诊,以及对复杂性胆管损伤的病人企图一期原位修复。...
...DNA酶Ⅰ(DNaseⅠ)是随机水解双链或单链DNA的一种内切酶,使DNA分子降解成带有5’磷酸末端的单核苷酸和寡核苷酸的混合物:在进行重组DNA研究时,必须注意防止DNA酶的污染,否则制备的DNA样品将会降解。因此器皿或试剂高温处理,...
...情况下,这些基因的蛋白质产物帮助修复DNA复制产生的错误,一旦MSH2、MSH6和MLH1蛋白质产生突变,就不能正常工作,不能修复复制错误,导致危险的DNA,因此也就易产生结肠癌。还不清楚的是,为什么在可能产生癌的所有组织中,基因突变是基础,...
...上海交通大学日前宣布,交大Bio-X生命科学研究中心和中科院上海生命科学院营养科学研究所已在试管中完成了DNA计算机的雏形研制工作,在实验中把自动机与表面DNA计算结合到一起。这标志着中国第一台“DNA计算机”问世。相关论文已发表在中国《...
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