DNA聚合酶 （DNA polymerase）是 细胞 复制 DNA 的重要作用 酶 。DNA聚合酶 , 以DNA为复制模板，从将DNA由5'端点开始复制到3'端的酶。DNA聚合酶的主要活性是催化DNA的合成（在具备模板、引物、dNTP等的情况下）及其相辅的活性。
（一）DNA的酶切与连接 （1）酶切反应 同质粒DNA的鉴定，只不过是质粒DNA换为载体DNA。若大量酶切，则成比例增加。 （2）加2倍体积的预冷无水乙醇和1/10体积的3mol/l NaAc混匀，-20℃2h以上。 （3）15000rpm离心15min，弃上清。 （4）加入75%乙醇洗涤2次，离心弃上清，真空抽干。 （5）加入适量1×TE溶解。如此可得线性...
...精细。 1．连锁分析检测 基因突变 指导遗传病的诊断 通过遗传 连锁图 可以在缺少任何 生化 或 分子性 质信息情况下对遗传病进行诊断。例如应用RFLP进行的 临床诊断 （详第十三章）。应当指出，由于多种 遗传标记 的定位，使RFLP的应用更加广泛。遗传图对 疾病诊断 的价值最明显的是当某一基因已被定位于某 染色体 ，但尚未被克隆时，就可依赖于运用一个或多个...
环境和生物体内的因素都经常会使 DNA 的结构发生改变。DNA的复制会发生 碱基 的配对错误；体内DNA会有自发性结构变化，包括DNA链上的碱基异构互变、 脱氨 基、碱基修饰、DNA链上的碱基脱落等。外界 射线 的照射等 物理因素 ， 烷化剂 、碱基类似物、修饰剂等 化学 因素都能损伤DNA的结构，变化包括有相邻 嘧啶 共价 二聚体 的形成、碱基、脱氧核糖和...
近年来国内外发展起来的高新技术方法，如 单克隆抗体 技术（McAb）、 免疫 印渍技术、 DNA 探针 技术和 基因扩增 技术等，为 寄生虫 病的诊断或寄生虫虫种分类提供新的途径，有广泛应用前景（详见附录）。
一、质粒DNA的提取及鉴定
DNA 在复制过程中，合成出的 前导链 为一条连续的长链。随从链则是由合成出许多相邻的片段，在 连接酶 的 催化 下，连接成为一条长链。连接作用是在连接酶催化下进行的。 连接酶(ligase)的作用是催化相邻的DNA片段以3′、5′－ 磷酸二酯键 相连接。连接反应中的能量来自 ATP (或NAD＋)。连接酶先与ATP作用，以 共价键 相连生成E桝MP中间体。...
(一) DNA 复制的起始点 很多实验都证明：复制是从DNA 分子 上的特定部位开始的，这一部位叫做复制起始点(originof replication)常用ori或o表示。 细胞 中的DNA复制一经开始就会连续复制下去，直至完成细胞中全部 基因组 DNA的复制。DNA复制从起始点开始直到终点为止，每个这样的DNA单位称为 复制子 或复制单元(replico...
DNA 存储着生物体赖以生存和繁衍的 遗传信息 ，因此维护DNA 分子 的完整性对 细胞 至关重要。外界环境和生物体内部的因素都经常会导致DNA分子的损伤或改变，而且与 RNA 及 蛋白质 可以在胞内大量合成不同，一般在一个 原核细胞 中只有一份DNA，在 真核 二倍体细胞 中相同的DNA也只有一对，如果DNA的损伤或遗传信息的改变不能更正，对 体细胞 就可...
1．蜡块的选择 从福尔马林固定的组织标本中未能提出完整的高分子量DNA的重要原因之一，是应用了固定不充分的组织。因此，在DNA提取前应检查组织切片。如果有自溶、退变或组织结构不清，大片出血等改变的蜡块不能用；若有明显坏死存在的蜡块，最好不用或将坏死部分切去后再用。尽可能地选用新近标本，缓冲福尔马林、丙酮和乙醇固定者最佳。 2．DNA提取方法 学的改善为了提高...
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