...许多疾病的遗传异质性,以及多数遗传的基因异常尚属未知,目前能直接诊断的病种虽日益增多,但仍然是比较有限的。表13-2 遗传的基因诊断方法基因异常方法探针、引物或限制酶基因缺失基因组DNA印迹杂交 PCR扩增缺失基因的探针 引物包括缺失或在...
...人血生长好。有11只猫的胃粘膜及1株培养出的细菌的DNA被提取出来作杂交和扩增。寡核苷酸探针长27bp,系螺杆菌属细菌特异探针,经3’-OH端加尾标记半抗原地戈辛素后作膜杂交,11只猫胃粘膜有8只为阳性,猫胃培养菌也为阳性。PCR引物系幽站...
...近年来基因诊断技术的应用,使淋病快速诊断有重大突破。目前用于淋球菌检测的基因诊断方法主要是基因探针技术。基因探针有质粒DNA探针,菌毛DNA探针,染色体基因探针和rRNA基因探针。取少许尿道或宫颈分泌物提取DNA,经PCR扩增,然后用其探针...
...RFLP分析是限制性内切酶、核酸电泳、印迹(blot)技术、探针-杂交技术的综合应用,多用于临床遗传性疾病的基因诊断。基本原理是遗传性疾病多有基因的缺陷,如基因缺失、基因插入、编码区小范围核苷酸序列改变或点突变等。前二者可将纯化的正常人和...
...reamplification)或同时在引物扩增序列内部选择一寡核苷酸作探针,对PCR扩增产物进行southernblt检测,则可使敏感性增加10倍~100倍,可检出难以培养的球形Hp。2 在Hp流行病学研究中的应用因为PCR检测Hp的敏感性高、特异性强、检查快速;...
...核酸的序列分析,即核酸一级结构的测定,是现代分子生物学中一项重要技术。目前应用的两种快速序列测定技术是Sanger等(1977年)提出的双脱氧链终止法及Maxam和Gilbert(1977年)提出的化学降解法,其中双脱氧链终止法是目前应用...
...基因片段克隆可得HLAⅠ类专用的探针,因为检测HLAⅠ类抗原序列的标志,目前也已得到Ⅱ类抗原特异的探针。由于HLA等位基因的多态性是表现在其核苷酸序列的差异上,由这些基因中克隆出的特异DNA片段,就可检测这些基因的差别。由于核苷酸序列不同,被...
...下游片段;现已制备了酵母人工染色体(YAC)大的线状DNA片段的杂交探针,这对于转座子插入序列的确定和基因库染色体上DNA片段序列的识别十分重要。该方法的不足是:①需要从许多酶中选择限制酶,或者说必须选择一种合适的酶进行酶切才能得到合理大小...
...广泛的应用前景。 在国家自然科学基金委、中国科学院和上海市科委的支持下,中科院上海应用物理所近日研制出一种新型的电化学DNA纳米生物传感器(CDS),这一生物传感器具有高灵敏度和高特异性。日前,《美国化学会会志》(《JACS》)在7月号正式...
...不变。转移结束后,经过80℃烘烤的DNA,将原位地固定于膜上。图13-6 Southern印迹杂交示意图当含有特定基因片段已原位转移到膜上后,即可与同位素标记了的探针进行杂交,并将杂交的信号显示出来。杂交通常在塑料袋中进行,袋内放置上述杂交...
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