...一、特异性目的核酸(或基因)的制备核酸分子探针的制备首先需要获得所要的特异性核酸或其片段。可用以下方法制备:(1)直接分离基因核酸:即从基因组上直接用内切酶切下所需基因。(2)化学合成基因核酸:即以单核苷酸为原料,以固相磷酸三酯法合成某一...
...:自己制备或市售商的单克隆抗体,绝大部分为小鼠IgG、Kappa型,所以酶标抗体选择抗小鼠IgG的多价抗体,进行ICC染色比较稳妥。(2)特异性:专一性强:单克隆抗体是由同一细胞株分泌的,性质均一,且有相同的亲合力,识别同一抗原决定簇。这在...
...胶体金溶液的制备有许多种方法,其中最常用的是化学还原法,基本的原理是向一定浓度的金溶液内加入一定量的还原剂使金离子变成金原子。目前常用的还原剂有:白磷、乙醇、过氧化氢、硼氢化钠、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等,下面分别介绍制备不同大小颗粒的...
...(一)玻璃器皿的清洁制备胶体金的成功与失败除试剂因素以外玻璃器皿清洁是非常关键的一步。如果玻璃器皿内不干净或者有灰尘落入就会干扰胶体金颗粒的生成,形成的颗粒大小不一,颜色微红、无色或混浊不透明。我们的经验是制备胶体金的所有玻璃器皿先用...
...国外已有数篇Hp单克隆抗体研制成功的报道。Negrini等把从培养皿中分离的6株Hp混合后免疫小鼠,32d后将小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞P3X63.Ag8.653融合,细胞融合悬液于96孔板上培养生长杂交瘤细胞集落,用整个Hp作靶细胞的...
...1996年,美国波士顿儿童医院的Judah Folkman博士从小鼠血管内皮细胞瘤EOMA中分离得到了内皮抑素。1997年,美国哈佛大学O′Reilly在小鼠肿瘤实验模型中,首先发现给予鼠重组内皮抑素可导致瘤体的消退,诱导癌细胞进入无限...
...免疫原是诱导机体产生抗体、并能与抗体发生反应的物质。能否制得合格的抗体由许多因素决定,而能否制备合格的免疫原则是其前提条件。而且作为诊断试剂的抗原也必须是单一特异性的,即纯化的抗原。自然众多的物质皆可成为免疫原,但绝少是单一成分(除非是...
...体内免疫法很难获得单克隆抗体(monoclonal antibody,McAb)。如能将所需要的抗体形成细胞选出并能在体外进行培养即可获得已知特异的单克隆抗体。1975年德国学者Kohler和英国学者Milstein将小鼠骨髓瘤细胞和经...
...理气药对荷瘤小鼠TNF和NK细胞活性的影响,探讨理气药的抗肿瘤作用。讨论TNF是迄今发现的直接杀伤肿瘤作用最强的生物学活性因子之一,且能与其它生物学因子协调,扩大抗肿瘤强度和范围,有重要的应用前景。研究发现,TNF虽然在体外对正常...
...制备饲养细胞层:一般选用小鼠腹腔巨噬细胞。与免疫小鼠相同品系的小鼠,常用BALB/C小鼠,6~10周龄↓拉颈 处死,浸泡在75%酒精内,3~5min↓用无菌剪刀剪开皮肤,暴露腹膜↓用无菌注射器注入5~6ml预冷的培养液(严禁刺破肠管)↓反复...
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