...（一）探针的选择根据不同的杂交实验要求，应选择不同的核酸探针。在大多数情况下，可以选择克隆的DNA或cDNA双链探针。但是在有些情况下，必须选用其它类型的探针如寡核苷酸探针和RNA探针。例如，在检测靶序列上的单个碱基改变时应选用寡核苷酸...
...双链过程称为退火或复性。用分子杂交进行定性或定量分析的最有效方法是将一种核酸单链用同位素标记成为探针，再与另一种核酸单链进行分子杂交。（三）探针——靶分子反应从化学和生物学意义上理解，探针是一种分子，它带有供反应后检测的合适标记物，并与特异靶...
...衣原体的临床诊断和分子流行病学调查。原位DNA杂交用于宫颈刮片和直肠活检标本，其结果与培养相似。但也有认为，在生殖道标本检测中，DNA探针不够敏感，特别是培养为弱阳性的标本。 7．聚合酶链反应（PCR）PCR是近年发展起来的新技术，能使核酸分子...
...如果已经知道目的基因的序列，就能很方便地用PCR聚合酶链式反应，polymerase chain reaction，从基因组DNA或cDNA中获得目的基因，可不必要经过复杂的DNA文库构建过程。PCR是70年代中期创立的技术，其基本原理如...
...以及RNA的含量，蛋白总含量、胞内pH值和细胞大小等为结构参数；细胞周期动力学、特殊配体的鉴定、特殊细胞的生物活性等则为功能参数。1．DNA和RNA的测量和分析DNA和RNA的含量可以用多种荧光探针标记后测出。对细胞内DNA含量的测定可用于...
...利用微孔板进行夹心杂交，可同时进行大量样品检测，他们先吸附DNA探针加到凹板中，然后用紫外线照射使其固定到塑料板上，用微孔板进行夹心杂交还可直接用于PCR技术。应用光敏生物素标记探针，检测PCR产物的敏感性和用32P标记探针（3×108...
...15-20min，EB染色5min。紫外灯下观察扩增条带。（2）Southern印迹杂交法：用32P标记的特异性探针检测PCR产物，方法同上。总之，在HSV感染性疾病的临床诊断中，PCR能对前病毒或潜伏期低复制的HSV特异性靶DNA片段进行...
...最多，最好的技术。一、Sanger双脱氧链终止法原理通常DNA的复制需要：DNA聚合酶，单链DNA模板，带有3'-OH末端的单链寡核苷酸引物，4种dNTP（dATP、dGTP、dTTP和dCTP）。聚合酶用模板作指导，不断地将dNTP加到...
...三、DNA探针已广泛应用于检测CMV，其中以32P标记的探针敏感性最高，对某些标本来说，杂交方法可能比病毒分离更敏感。四、聚合酶链式反应（PCR）（一）标本的采集及处理采集的标本包括患者的血液、尿，以及腺体组织等。由全血制备的血沉棕黄层（...
...CSF（脑脊液）中病毒DNA。 4.巨细胞病毒性脑炎：少见，常见于免疫缺陷如AIDS或长期应用免疫抑制剂患者，亚急性或慢性病程，体液见巨细胞、PCR（聚合酶链反应）检出CSF（脑脊液）中病毒DNA。 5.急性播散性脑脊髓炎：有感染或接种疫苗史...
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