...制备高质量的核酸探针和获得合格的待测物（提取的mRNA样品或细胞/组织标本）。核酸探针是指一段用放射性同位素或其他标记物（如生物素、地高辛等）标记并与目的基因互补的DNA片段或单链DNA、RNA。根据其来源可分为cDNA探针、寡核核苷酸探针...
...制备高质量的核酸探针和获得合格的待测物（提取的mRNA样品或细胞/组织标本）。核酸探针是指一段用放射性同位素或其他标记物（如生物素、地高辛等）标记并与目的基因互补的DNA片段或单链DNA、RNA。根据其来源可分为cDNA探针、寡核核苷酸探针...
...分子生物学技术质量控制对检验技术的具体要求首先是检验诊断学的质量保证，由完善、合理的实验设计来完成。⒈特异性杂交技术是通过基因克隆制备探针来完成，PCR是通过引物来完成，RFLP是利用限制内切酶来完成等。即探针、引物、限制性内切酶在反应中都具有...
...分子生物学技术质量控制对检验技术的具体要求首先是检验诊断学的质量保证，由完善、合理的实验设计来完成。⒈特异性杂交技术是通过基因克隆制备探针来完成，PCR是通过引物来完成，RFLP是利用限制内切酶来完成等。即探针、引物、限制性内切酶在反应中都具有...
...清楚的DNA或需确定DNA带的特异性时，可用标记的公用混合探针和（或）型特异探针作Southern吸印杂交、斑点杂交验证。按照标准方法制32p ATP标记的寡核苷酸探针，需达到约107cpm/pmol特异活性。杂交液中需含有2×106-5×...
...在大肠杆菌T4噬菌体多聚核苷酸激酶（T4PNK）的催化下，将γ-32P-ATP上的磷酸连接到寡核苷酸的5’末端上。要求标记的寡核苷酸5’端必须带羟基。反应式为：此法适用于标记合成的寡核苷酸探针。如将底物改为Bio –11 –dUTP，也...
...大致有三种方法。①标记亲合素－生物素法（labelled avidin- biotin method,LAB法）：将亲合素与标记物（HRP）结合，一个亲合素可结合多个HRP；将生物素与抗体（一抗与二抗）结合，一个抗体分子可连接多个生物素分子，...
..., pH7.0）透析。（2）去除蛋白质中的沉淀：长期低温保存的蛋白质或4℃较长时间保存的抗体，特别是在浓度高于2mg/ml的情况下，很容易形成聚合物，聚合物对标记过程及免疫金探针的稳定性有一定影响，因此，标记之前须离心以除去这些聚合物。一般...
...基因设计并合成一对特异PNA探针，经生物素标记后，分别与链霉亲和素包被的磁珠或Cy5纳米颗粒结合；探针与待测鼠疫菌的DNA杂交后，磁性纳米颗粒牢固连接靶核酸-探针结合体，用磁分离架收集后即可得纯化的特异核酸分子，经变性处理后对Cy5荧光纳米...
...。探针的标记物可以是放射性同位素，也可以是非放射性生物素和半抗原等。放射性同位素中，3H和35S最为常用。3H标记的探针半衰期长，成像分辨率高，便于定位，缺点是能量低。35S标记探针活性较高，影像分辨率也较好。而32P能量过高，致使产生的...
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