荧光抗体制备_《免疫学和免疫学检验》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...白质结合比率。抗体效价可以用琼脂双扩散法进行滴定,效价大于1:16者较为理想。荧光素与蛋白质结合比率(F/P)的测定和计算的基本方法是:将制备的荧光抗体稀释至A 280 1≈1.0,分别测读A 280 (蛋白质特异吸收峰)和标记荧光素的特异吸收峰,按公式计算。 F/P值越高,说明抗体分子上结合的荧光素越多,反之则越少。一般用于固定标本的荧光抗体以F/P=1...

http://qihuangzhishu.com/1016/156.htm

血涂片制备和细胞染色_《临床基础检验学》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...仪器结果简易方法。比台观察10个高倍视野血涂片中白细胞和血小板数大致估计血内这些细胞的数量,借以作为仪器结果分析后质控的参考。 但积压涂片制备和染色不良,常使细胞鉴别发生困难,甚至导致错误结论。例如,血膜过厚细胞重叠缩小,血膜太薄白细胞多集中于边缘,细胞分布不匀;染色偏酸或偏碱均可使细胞染色反应异常。因皮制备厚薄适宜,分布均匀,染色良好的血涂片是血液学检查...

http://qihuangzhishu.com/1003/8.htm

半抗原免疫原制备_《免疫学和免疫学检验》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...这种半抗原与蛋白质或其他高聚物结合后才能刺激机体产生抗体。结合方法有物理法和化学法。物理吸附的载体有淀粉、聚乙烯吡咯烷酮(PVP),硫酸葡聚糖、羧甲基纤维素等,是通过电荷和微孔吸附半抗原。化学法是利用功能团把半抗原以载体上。 (一)载体选择 1.蛋白质类蛋白质是结构复杂的大分子胶体物质,是一种良好的载体。常用的有 人血 清白蛋白、 牛血 清白蛋白、牛甲状腺...

http://qihuangzhishu.com/1016/86.htm

寡核苷酸探针制备_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

利用寡核苷酸自动合成仪,可很简单地合成制备寡核苷酸探针(如15~50bp),这类探针具有以下优点:①短探针比长探针杂交速度快,特异性强。②可以在短时间内大量制备。③在合成中进行标记制成探针。④可合成单链探针,避免了用双链DNA探针在杂交中自我复性,提高杂交效率。⑤寡核苷酸探针可以检测小DNA片段,在严格的杂交条件下,可用于检测在序列中单碱基对的错配。 因此...

http://qihuangzhishu.com/969/531.htm

颗粒性抗原制备_《免疫学和免疫学检验》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

颗粒性抗原主要是指细胞抗原或细菌抗原。最常用细胞抗原为制备溶血素用的绵羊红细胞。这种抗原制备比较简单,采集新鲜绵羊红细胞,以无菌盐水洗涤3次(每次离心2000r/min10min),最后配成10 6 /ml浓度的细胞悬液,即可应用。细菌抗原多用液体或固体培养物经集菌后处理。H抗原用有动力的菌株,菌液用0.3%~0.5%甲醛处理,而O抗原则需要100℃加温2...

http://qihuangzhishu.com/1016/84.htm

单克隆抗体制备_《免疫学和免疫学检验》在线阅读_【中医宝典】

1975年Kǒhler和Milstein首先报道用细胞杂交技术使经绵羊红细胞(SRBC)免疫小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合,建立起第一个B细胞杂交瘤细胞株,并成功地制得抗SRBC的单克隆抗体(monlclonalantibody,McAb)。迄今世界已研制成数以千计的McAb。 单克隆抗体的理化性状高度均一,生物活性单一,与抗原结合的特异性强,便于人为处理和质...

http://zhongyibaodian.com/mianyixuehemianyixuejianyan/1016-16-0.html

胶体金标记物制备_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...时,蛋白质带正电荷,胶体金带负电荷,二者极易静电结合形成大聚合物。如果pH高于蛋白质等电点时,蛋白质带负电荷,与金颗粒的负电荷相互排斥而不能互相结合。为防止蛋白质与胶体金的聚合与沉淀,常用 牛血 清白蛋白,卵白蛋白,聚乙二醇或 明胶 作稳定剂。用Sephacryb S—400 (丙烯葡聚糖S—400)层析分离纯化胶体金蛋白标记物只适用于以BSA作稳定剂者。

http://qihuangzhishu.com/969/131.htm

抗血清制备_《免疫学和免疫学检验》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...插入一较粗 玻璃 管,将血管与玻璃管用线扎牢,玻璃管接一橡皮管引血入瓶,也极为方便。 2.心脏采血法此法多用于豚鼠、大鼠、鸡等小动物。采血技术应熟练,穿刺不准容易导致动物急性死亡。 3.静脉多次采血法家兔可用耳中央静脉,山羊可用颈静脉。这种放血法可隔日一次,有时可采集多量血液。如用耳静脉切开法,一只家兔可采百余毫升血液(用颈动脉放血最多可获70~80ml,...

http://qihuangzhishu.com/1016/88.htm

电镜标本制备方法_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

1.固定 同常规电镜一样,应用醛类和四氧化锇双固定,以维持细胞和组织超威结构。有文献报告以4%的甲醛溶液在pH7.2的磷酸缓冲内,在0℃进行固定,并用四氧化锇作后固定,不会影响抗原的反应能力。高锰酸钾能使大部分抗原失去活性,一般不宜采用。另外,铁蛋白标记抗体的特点之一是分子量大。因此,如用于细胞表面抗原的定位研究,可将样品直接放入固定液,否则需采取适当的措...

http://qihuangzhishu.com/969/190.htm

胶体金特性和制备_《免疫学和免疫学检验》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...小而变化,大颗粒胶体金λmax偏向长波长,反之,小颗粒胶体金的λmax则偏于短波长,表19-1所列为部分胶体金的λmax。 (三)胶体金的制备 1.制备方法胶体金的制备多采用还原法。氯金酸(HauC1 4 )是主要还原材料,常用还原剂有 柠檬 酸钠、鞣酸、抗坏血酸、白磷、硼氢化钠等。根据还原剂类型以及还原作用的强弱,可以制备0.8nm~150nm不等的胶体...

http://qihuangzhishu.com/1016/172.htm

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