...不良细胞和角化过度细胞,可初步HPV诊断。(二)检测HPV DNA:根据不同标本采用点杂交或原位杂交检测HPV-DNA。亦可选择适当的特异序列,合成引物做PCR后进行杂交,PCR具有敏感,特异及可选择不同型别的引物扩增后分型等优点。(三)...
...(一)DEPC水是经DEPC处理过的灭菌蒸馏水。DEPC即二乙基焦碳酸酯(diethylprocarbonate),可灭活各种蛋白质,是RNA酶的强抑制剂。原位杂交在杂交及其以前的各步处理中,所有液体试剂都应经DEPC处理。方法是:取市售...
...才能完成。 (二)发病机制 临床及动物实验观察HDV感染后,肝脏功能损害与血清及肝内HDAg滴度成正比,应用原位杂交技术检测肝内HDV RNA多分布在肝细胞损害程度较明显的区域,故认为HDV有直接致肝细胞损伤作用。有的学者亦发现慢性乙肝或...
...才能完成。 (二)发病机制 临床及动物实验观察HDV感染后,肝脏功能损害与血清及肝内HDAg滴度成正比,应用原位杂交技术检测肝内HDV RNA多分布在肝细胞损害程度较明显的区域,故认为HDV有直接致肝细胞损伤作用。有的学者亦发现慢性乙肝或...
...消化法测定大鼠肝组织匀浆羟脯氨酸(Hyp)含量;以放射免疫分析法测定层黏连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)、透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)含量;电镜下观察胶原纤维增生程度;以原位杂交法观察TGF-β1mRNA的表达。结果显示,预防性...
...DNA片段的克隆噬菌斑,通过原位杂交,从中可筛出含有目的基因片段的克隆,然后通过细胞扩增,制备出大量的探针。为了制备cDNA 探针,首先需分离纯化相应mRNA,这从含有大量mRNA的组织、细胞中比较容易做到,如从造血细胞中制备α或β珠蛋白...
...味苦温。主风寒湿痹死肌,痉疸,止汗,除热,消食,作煎饵。久服,轻身延年,不饥。一名山蓟(艺文类聚引作山筋),生山谷。《吴普》曰:术,一名山连,一名山芥,一名天苏,一名山姜(艺文类聚)。《名医》曰:一名山姜,一名山连,生郑山,汉中,南郑,...
...(一)组织切片的原位杂交细胞化学方法(1)组织准备:大鼠以10%水合氯醛(0.3ml/100g 体重),或1%戊巴比妥钠约1ml(3~4mg/100g体重)腹腔内注射麻醉,用100ml生理盐水冲洗和150ml 4%多聚甲醛主动脉灌注固定。...
...克隆化,故能较容易地得到某一细胞因子的cDNA探针或根据已知的核苷酸序列人工合成寡聚核苷酸探针。利用基因探针检测细胞因子mRNA表达的方法多种多样,常使用斑点杂交、Northernblot、逆转录PCR,细胞或组织原位杂交等。实验的关键在于...
...(1)切片入PBS冲洗5min,最好是将切片漂洗于灭菌器皿中。(2)0.1mol/L 甘氨酸PBs 5min。(3)0.4%Triton X-100 PBS 15min。(4)1μg/ml蛋白酶K,37℃保温30min。(5)4%多聚甲醛...
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