...基因组基因，而从cDNA文库中获得的是已经过 剪接 、去除了 内含子 的cDNA。 图20-9 cDNA文库的构建 三、 聚合酶链式反应 （PCR） 如果已经知道目的基因的序列，就能很方便地用PCR聚合酶链式反应，polymerase chain reaction，从基因组DNA或cDNA中获得目的基因，可不必要经过复杂的DNA文库构建过程。PCR是70年代...
聚合酶链反应（PCR）或称体外基因倍增技术，它利用一对位于待扩增的DNA序列两端的取向相对的DNA引物，在DNA聚合酶的介导下，经过多次变性，退火和延伸过程的重复性循环，大量合成靶DNA序列。在标记dNTP存在时，经PCR反应产生的靶DNA片段均参入了标记物，用此法标记的探针标记率高达97.4%。此法重复性好，简便、快速、特异、不要求模板DNA的纯度，可以大...
...免疫反应同婴儿的抗体反应相区别，因为母亲的IgG可传递给胎儿。另外由于IgG终身存在，所以很难评价治疗结果。血清学诊断常常又存在着假阳性。 PCR检测梅毒螺旋体DNA，特异性很强，敏感性很高，是目前诊断梅毒螺旋体的先进方法。 （一）PCR引物的设计部位与序列： 目前有四套扩增梅毒螺旋体DNA的系统：扩增47KDa膜抗原基因（tpp47基因），扩增39KDa碱...
...：多克隆性 高球蛋白血症 ， 循环免疫复合物 形成和 自身抗体 形成。 （3）NK细胞活性下降 （4）各种 致病性 感染 的 病原体 检查如PCR。 组织学 证实的 恶性肿瘤 ，如KS； （三） HIV 抗体 检测 1. 酶联免疫吸附法 （ELISA）；2. 明胶 颗粒 凝集 试验（ PA ）；3. 免疫荧光 检测法（IFA）；4. 免疫 印迹检测法（Wes...
...儿的 抗体反应 相区别，因为母亲的IgG可传递给 胎儿 。另外由于IgG终身存在，所以很难评价治疗结果。血清学诊断常常又存在着 假阳性 。 PCR检测梅毒螺旋体 DNA ，特异性很强，敏感性很高，是目前诊断梅毒螺旋体的先进方法。 （一）PCR 引物 的设计部位与序列： 目前有四套 扩增 梅毒螺旋体DNA的系统：扩增47KDa膜 抗原 基因 （tpp47基因）...
...2）B淋巴细胞功能失调：多克隆性高球蛋白血症，循环免疫复合物形成和自身抗体形成。 （3）NK细胞活性下降 （4）各种致病性感染的病原体检查如PCR。组织学证实的恶性肿瘤，如KS； （三）HIV抗体检测 1.酶联免疫吸附法（ELISA）；2. 明胶 颗粒凝集试验（PA）；3.免疫荧光检测法（IFA）；4.免疫印迹检测法（Western Blot，简称WB法）；...
...补，证实这种探针比较敏感，可以检出少至5000个～10000个Hp。 近年来聚合酶链反应（polymerasechain reaction，PCR）技术已经用于Hp的诊断，该技术的敏感性比寡核苷酸探针增加了100倍，可以检出少至100个Hp。目前Hp的尿素酶基因和16SrRNA基因的部分序列已经测出，为PCR特异性引物的选择提供了依据。我们以一对与16SrR...
多聚酶链反应 多聚酶链反应（Poly-merasechain reaction，PCR）实际上是一种核酸片段体外扩增试验。做这一试验的先决条件是首先必须弄清楚某一基因的核苷酸序列然后人工合成其中两个特异性处段（其长度以15—30个碱基为宜，不宜过短或过长）作为引物，在PCR仪中经过30—50个温度循环扩增其核酸片段，使其呈几何级数长，然后取其产生或其酶切片段...
...、DNA探针 已广泛应用于检测CMV，其中以32P标记的探针敏感性最高，对某些标本来说，杂交方法可能比病毒分离更敏感。 四、聚合酶链式反应（PCR） （一）标本的采集及处理 采集的标本包括患者的血液、尿，以及腺体组织等。由全血制备的血沉棕黄层（buffy coats）可保存于-80℃；尿液标本可保存于液氮中。冻存标本应避免反复冻融。 尿液标本经2500r/m...
...uchi等报道，可以从人的单根毛发的毛囊细胞中抽提DNA，并结合运用DNA聚合酶链反应（polymerase chain reaction,PCR）技术，分析了单根毛发细胞中抽提的线粒体DNA的D环区（D-loopregion）的“DNA”指纹图”。 PCR技术由Mullis等首创（详见第二十二章 ）。它又称为DNA体外扩增技术，是用DNA聚合酶在体外扩增一...
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