...（1）将整封染色体铺片放置于金网上，在70%的酒精蒸汽固定4～15h，空气干燥。（2）以强碱使DNA变性，将金网置于2×SSC内（应用0.1n NaOH调整至pH12），室温，2min。（3）脱水，以70%和95%酒精各冲洗3次，空气干燥...
...min左右。（3）PBS—BSA洗5min×3。（4）1%四氧化锇后固定1～2h（5）系列梯度乙醇或丙酮脱水（6）临界点干燥或冰冻干燥（7）喷镀碳与金（8）扫描电镜观察三、冷冻蚀刻免疫电镜技术冷冻蚀刻法（Freeze Ftching），也称冷冻...
...1h。应用2×SSC漂洗2×3min，室温，梯度酒精脱水（70%，90%，100%），在空气中干燥。（3）蛋白酶K和多聚甲醛处理：对单个拷贝杂交，蛋白酶K溶液（0.3～0.6μg/ml，在20mmol/l Tris –HCl, pH7.5,...
...就是已使用新法的实验室，也不一定掌握得很好，本节将比较详细地从分类，酶偶联反应，测定注意事项等方面对连续监测法加以介绍。（一）连续监测法种类⒈直接连续监测法这类方法是使用各种分析手段，如分光亮度法、荧光法、pH计、旋光计、电导仪等等，在不...
...非常必要的。国外有人用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测临床病人血清中有Hp抗体报道，国内尚未有这方面研究报告。本文报道建立一种检测人体抗Hp抗体的ELISA的实验结果及与细菌培养法和尿素酶测定法对比检测结果，研究证明本法特异、敏感、适用于...
...疾病，需要一种快速、准确而直观的检测Hp手段。目前，检测Hp手段较多，包括：切片法、涂片法、刷检法、培养法、尿素酶法、13C呼气试验法及抗体检法等。这些方法归纳起来，有以下缺点：①需取材标—费事；②标本需要处理—费时间；③作者的新鲜胃切除标本...
...疾病，需要一种快速、准确而直观的检测Hp手段。目前，检测Hp手段较多，包括：切片法、涂片法、刷检法、培养法、尿素酶法、13C呼气试验法及抗体检法等。这些方法归纳起来，有以下缺点：①需取材标—费事；②标本需要处理—费时间；③作者的新鲜胃切除标本...
...标记探针DNA。近年来，非同位素标记方法发展很快，已有取代同位素标记法的趋势。地高辛配基随机标记DNA探针法，是较为成功的一种非同位素标记方法。其原理是：用化学方法把类固醇类半抗原地高辛分子连接在dUTP上（Dig-dUTP）。用随机引物及...
...0.1%Triton X—100 的PBS孵育30min，以封闭非特异性结合部位（3）1%硼氢化钠的PBS孵育30min。（4）一抗37℃，2h。（5）PBS含0.1%BSA pH7.4 冲洗3min×3次。（6）PBS含0.1%BSA pH...
...。（2）补体用新鲜豚鼠血清一般作1：10稀释或按补体结合反应试管法所测定的结果，按2单位的比例，用Kolmers盐水稀释备用。Kolmers盐水配法：即在pH7.4、0.1mol/L的磷酸缓冲盐水中，溶解MgSO4的含量为0.01%浓度。（...
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