...步变性、复性后，整个反应过程不再需要温度循环。具体方法如下：制备引物A、B，引物A有T ７ RNA多聚酶识别、结合位点。将引物、样本加入扩增缓冲液中，65℃，1min，降温至37℃，加入人工具酶，37℃保温1h，冰浴中止反应。可用葡聚糖夹心法检测扩增产物。 这一方法有几点值得注意：（1）反应是在37℃恒温中进行的；（2）产物中有RNA，反义RNA的cDNA，...
...V-2抗体检测，如蛋白印迹法也可用gD2作抗原检测HSV-2抗体，具有敏感性，且能区分HSV-1和HSV-2的优点。 四、基因诊断 （一）用PCR分型检测 单纯疱疹 病毒 PCR是一种敏感性高，特异性强的快速检测方法，标本中含有1fg HSV-DNA就可以检出，其在HSV感染的诊断研究中发展较快，且分型检测HSV是发展的趋势。 1、标本采集和处理 （1）标本...
...、DNA探针 已广泛应用于检测CMV，其中以32P标记的探针敏感性最高，对某些标本来说，杂交方法可能比病毒分离更敏感。 四、聚合酶链式反应（PCR） （一）标本的采集及处理 采集的标本包括患者的血液、尿，以及腺体组织等。由全血制备的血沉棕黄层（buffy coats）可保存于-80℃；尿液标本可保存于液氮中。冻存标本应避免反复冻融。 尿液标本经2500r/m...
...准品作为定量的基准。应要求高度纯化。标准品除含量应具有准确性外，还应具备稳定性，即在合理的贮存条件下保持原来的特性。 按实验要求，将标准品用缓冲液配成含不同剂量的标准溶液，用于制作标准曲线。 （二）标记物 标记抗原应具备：①比放射性高，以保证方法的灵敏度；②免疫活性好；③所用的核素的半衰期尽可能长，标记一次可较长时间使用，这对来之不易的抗原尤其重要；④标记简...
...准品作为定量的基准。应要求高度纯化。标准品除含量应具有准确性外，还应具备稳定性，即在合理的贮存条件下保持原来的特性。 按实验要求，将标准品用缓冲液配成含不同剂量的标准溶液，用于制作标准曲线。 （二）标记物 标记抗原应具备：①比放射性高，以保证方法的灵敏度；②免疫活性好；③所用的核素的半衰期尽可能长，标记一次可较长时间使用，这对来之不易的抗原尤其重要；④标记简...
...：多克隆性 高球蛋白血症 ， 循环免疫复合物 形成和 自身抗体 形成。 （3）NK细胞活性下降 （4）各种 致病性 感染 的 病原体 检查如PCR。 组织学 证实的 恶性肿瘤 ，如KS； （三） HIV 抗体 检测 1. 酶联免疫吸附法 （ELISA）；2. 明胶 颗粒 凝集 试验（ PA ）；3. 免疫荧光 检测法（IFA）；4. 免疫 印迹检测法（Wes...
...2）B淋巴细胞功能失调：多克隆性高球蛋白血症，循环免疫复合物形成和自身抗体形成。 （3）NK细胞活性下降 （4）各种致病性感染的病原体检查如PCR。组织学证实的恶性肿瘤，如KS； （三）HIV抗体检测 1.酶联免疫吸附法（ELISA）；2. 明胶 颗粒凝集试验（PA）；3.免疫荧光检测法（IFA）；4.免疫印迹检测法（Western Blot，简称WB法）；...
...低度恶变的过程，即所谓 疣状癌 。 五、基因诊断 迄今，HPV难于用传统的病毒培养及血清学技术检测，主要实验诊断技术是核酸杂交。近年来发展的PCR方法具有特异、敏感、简便、快速等优点，为HPV检测开辟了新途径。 （一）标本的采集及处理 1．标本的采集和预处理：用刮板或生理盐水浸润的棉棒从阴道和宫颈外口取分泌物和细胞。在作细胞学检查的同时，将标本放入5ml含有...
...多，其缺点是不够敏感，因此，需要一种快速、可靠，具有高度敏感性的检测方法。聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）用于检测Hp感染国外已有报道，国内也有人用此方法检测唾液中的Hp。本文报道了用PCR技术从胃粘膜活组织中检测Hp，并探讨该方法在Hp感染的诊断和在评价治疗后根除效果中的意义。 1 材料和方法 1.1 PCR方法的...
...多，其缺点是不够敏感，因此，需要一种快速、可靠，具有高度敏感性的检测方法。聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）用于检测Hp感染国外已有报道，国内也有人用此方法检测唾液中的Hp。本文报道了用PCR技术从胃粘膜活组织中检测Hp，并探讨该方法在Hp感染的诊断和在评价治疗后根除效果中的意义。 1 材料和方法 1.1 PCR方法的...
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