制备单克隆抗体是复杂而费时的工作，整个技术流程如图11-2。 （一）抗原提纯与动物免疫 对抗原的要求是纯度越高越好，尤其是初次免疫所用的抗原。如为细胞抗原，可取1×10 7 个细胞作腹腔免疫。可溶性抗原需加完全福氏佐剂并经充分乳化，如为聚丙烯酰胺电泳纯化的抗原，可将抗原所在的电泳条带切下，研磨后直接用以动物免疫。 选择与所用骨髓瘤细胞同源的BALB/c健康小...
模式标本 （type specimen）即作为规定的典型（type） 标本 。在确定及发表某一群生物的 学名 时，应指出此学名的特征与作为分类概念标准的模式标本，但并不一定限于此群的典型代表。以前人们并未重视典型这个观念，因此造成许多标本未能保存下来。现在实行的 命名法规 ，在植物方面，是以1753年林奈（C．vonLinné）出版的《植物种志》（Speci...
...）感染在人群中广泛存在，Hp的分型鉴定对其感染的临床及 流行病学 研究具有重要意义。国外文献报道的几种基因型技术使Hp的分型鉴定成为可能，而PCR及单链构象多态性（Signle-strand conformationpolymorphisms,SSCP）分析在菌株分型鉴定中的应用则尚未见报道。作者采用PCR-SSCP分析区分不同来源的Hp，并探讨其应用价值。...
血液标本 的采集是分析前质量控制的重在环节，可分为 毛细血管 采血法和静脉采血法。需要 血量 较少的检验，如手工法或半自动 血细胞分析 仪 血细胞 计数，常用 毛细管 采血法。需血量较多检验，如 红细胞 比积、临床 生化 检验、全自动血细胞分析血细胞计数一般用 静脉采血 法。特别是全自动血细胞分析仪，无论仪器进样品多少，为防止血样中小凝块的形成，保证仪器进样...
胶体金标记蛋白质的原理，一般认为是由于pH值等于或稍偏碱于蛋白质等电点时，蛋白质呈电中性，此时蛋白质分子与胶体金颗粒相互间的静电作用较小，但蛋白质分子的表面张力却最大，处于一种微弱的水化状态，较易吸附于金颗粒的表面，由于蛋白质分子牢固地结合在金颗粒的表面，形成一个蛋白层，阻止了胶体金颗粒的相互接触，而使胶体金处于稳定状态，如果＝低于蛋白质的等电点时，蛋白质带...
1975年Kǒhler和Milstein首先报道用细胞杂交技术使经绵羊红细胞（SRBC)免疫的小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合,建立起第一个B细胞杂交瘤细胞株,并成功地制得抗SRBC的单克隆抗体（monlclonalantibody,McAb）。迄今世界已研制成数以千计的McAb。 单克隆抗体的理化性状高度均一，生物活性单一，与抗原结合的特异性强，便于人为处理和质...
一、动物的选择 选择合适的动物进行免疫极为重要。选择时应考虑以直几个因素：①抗原与免疫动物的种属差异越远越好；亲缘关系太近不易产生抗体应答（如兔－大鼠之间，鸡－鸭之间）。②抗血清量的需要：大动物如马、骡等可获得大量血清（一头成年马反复采血可获得10000ml以上的抗血清）；但有时抗体需要是不多，选用家兔或豚鼠即可。③抗血清的要求：抗血清可分为R型和H型。H型...
...病原微生 物都有自己特异的引物。 （2）耐热的DNA 聚合酶 ：此酶是从耐热 细菌 中分离出来的，能耐受高温90℃-100℃。 （3）10×PCR 缓冲液 ：500mmol/l KCl;100mmol/LTris-HCl(pH8.4,20℃)150mmol/L MgCl2,1mg/ml 明胶 。10×PCR缓冲液随酶一起购买。 （4）5mmol/L dNTP...
...小而变化，大颗粒胶体金的λmax偏向长波长，反之，小颗粒胶体金的λmax则偏于短波长，表19-1所列为部分胶体金的λmax。 （三）胶体金的制备 1．制备方法胶体金的制备多采用还原法。氯金酸（HauC1 4 ）是主要还原材料，常用还原剂有 柠檬 酸钠、鞣酸、抗坏血酸、白磷、硼氢化钠等。根据还原剂类型以及还原作用的强弱，可以制备0.8nm～150nm不等的胶体...
（1）取0.01%HAuCl 4 上水溶液100ml，加热至沸腾。 （2）加入40μl 195 Au。 （3）迅速加入4ml1% 柠檬 酸三钠水溶液，5～7min出现透明的橙红色。 （4）其含量为I×10 6 脉冲数/min。 （八）微波制备液体金方法。
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