...不对称PCR的基本原理是采用不等量的一对引物产生大量的单链DNA(ss-DNA)。这两种引物分别称为限制性引物与非限制性引物;其最佳比例一般为1:50~1:100,关键是限制引物的绝对量。限制性引物太多太少,均不利于制备ss-DNA。也...
...标本采集根据病变部位的不同,可采集痰、胸水、腹水、尿、脑脊液、粪便、分泌物及组织等。 涂片未找到抗酸杆菌、培养未检出结核分支杆菌。 通过涂片检查到抗酸杆菌,可初步诊断为结核病,同时应做结核分支杆菌培养与其他分支杆菌的鉴别。如果培养出结核...
...DNA是染色体的主要组成部分,是PCR的扩增模板。要进行PCR,研究DNA结构与功能或者用于诊断目的,首先必须从生物体内提取DNA。DNA往往以核蛋白形式存在,其分子量大(人的染色体DNA平均大小为3.0×109bp),提取DNA应尽量...
...1.DNA-PCR定量用同位素标记的探针与电泳分离后的PCR扩增产物进行杂交,根据放射自显影后底片曝光强弱可以对模板DNA进行定量。Abbot等利用这种方法对人类T细胞白血病反转录基因进行了定量研究。PCR扩增产物用专为检测ds-DNA而...
...应当,应该 [should] 应,当也。——《说文》 应,当也。——《尔雅》 文王既勤止,我应受之。——《诗·周颂·赉》 故国神游,多情应笑我。——宋· 苏轼《念奴娇·赤壁怀古》 应是良晨好景虚设。——宋· 柳永《雨霖铃》 凡所应有。——...
...buffy coats)可保存于-80℃;尿液标本可保存于液氮中。冻存标本应避免反复冻融。尿液标本经2500r/min离心10min,以除去细胞碎片,收集上清液。由于尿液中含有PCR抑制剂,因此需用聚乙二醇(PEG6000)进行预处理:50μ...
...去除第一引物。此方法已成功地用来分析中国仓鼠卵巢细胞AS52的分子突变。AS52细胞含有单拷贝的细胞gpt(guanine phos-phribosytransferase)基因,与哺乳动物具有同源性。套式引物PCR减少了引物非特异性退火,...
...ELISA方法具有更高的敏感性和特异性,可用来确诊其他血清试验结果,尤其是对处于界值附近的患者血清。4.2 聚合酶链反应(PCR)该技术的敏感性比寡核甙酸探针增加了100倍,可以检出至少100个Hp。目前Hp的尿素酶基因和16SrRNA基因的...
...ELISA方法具有更高的敏感性和特异性,可用来确诊其他血清试验结果,尤其是对处于界值附近的患者血清。4.2 聚合酶链反应(PCR)该技术的敏感性比寡核甙酸探针增加了100倍,可以检出至少100个Hp。目前Hp的尿素酶基因和16SrRNA基因的...
...羊水细胞或脐血,获得基因组DNA以聚合酶链反应(PCR)技术对高危胎儿进行产前诊断,重型/中间型患儿应终止妊娠。...
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