(一)DNA的酶切与连接 (1)酶切反应 同质粒DNA的鉴定,只不过是质粒DNA换为载体DNA。若大量酶切,则成比例增加。 (2)加2倍体积的预冷无水乙醇和1/10体积的3mol/l NaAc混匀,-20℃2h以上。 (3)15000rpm离心15min,弃上清。 (4)加入75%乙醇洗涤2次,离心弃上清,真空抽干。 (5)加入适量1×TE溶解。如此可得线性...
...害时血中及尿中THP下降以外,目前提出当 肾移植 急性排斥反应时或毒性物质导致肾小管大量破坏时,尿中可出现THP升高。 2.尿中抗体包裹细菌的测定 尿路感染 可分为上尿路感染( 肾盂肾炎 )和下尿路感染( 膀胱炎 、 尿道炎 及 前列腺炎 )。上尿路感染时,细菌来源于肾组织,机体对细菌产生抗体而包裹于细菌表面,形成抗体包裹细菌(ACB)。抗体为IgG、IgA...
从DNA水平上寻找确诊遗传病的指标或探讨遗传病和肿瘤的病因等方面,已取得很大成绩,这对产前诊断,早期确诊和突变基因携带者的检出等都有重要意义。所用的方法大体有以下几种。
近年 ICC技术在下述方面的应用,令人注目,有着广阔的前景。现介绍如下:
荧光抗体是免疫荧光细胞化学的重要技术之一,制备高特异性和高效价的荧光抗体必须选用高质量的荧光素和高特异性高效价的免疫血清。
胶体金溶液的制备有许多种方法,其中最常用的是化学还原法,基本的原理是向一定浓度的金溶液内加入一定量的还原剂使金离子变成金原子。目前常用的还原剂有:白磷、乙醇、过氧化氢、硼氢化钠、抗坏血酸、 枸橼 酸钠、鞣酸等,下面分别介绍制备不同大小颗粒的胶体金溶液。
关于自身抗体产生的机理众说纷纭,十分复杂,免疫细胞化学和其他方法的结合,有助于从形态、功能和代谢三个方面深入探讨。根据目前研究的情况,有以下几种学说。
引物在PCR反应中的浓度一般在0.1~1μmol/L之间。浓度过高易形成引物二聚体且产生非特异性产物。一般来说用低浓度引物经济、特异,但浓度过低,不足以完成30个循环的扩增反应,则会降低PCR的产率。
...e等,现简介如下。 1.戊二 醛标记法戊二醛为制备各种酶标抗体最常用的偶联剂。市售戊二醛往往含有戊二酸、丙烯释及戊二醛自身聚合本等杂质,故需纯化后使用。戊二醛的纯度用含杂质的二醛的单体戊二醛的OD比值表示,它们的最大吸收光波长分别为235nm 和280nm,二者的OD比值(235/280)小于3时,制备酶标抗体的效果较好,大于3时,需经蒸馏或Sephadex...
...围及“正常”皮肤处有IgG的沉积,且其荧光强度与病情的严重程度相平行;②血清中的Pab滴度与病情的严重程度相平行;③进行皮肤器官培养时,加入纯化的Pab可导致天疱疮样的棘层松解;④用血浆交换法去除Pab可导致天疱疮的缓解。 天疱疮抗体是针对表皮细胞膜多糖萼的抗体,其在体内与表皮细胞膜结合后可能使表皮细胞释放蛋白溶解酶如u –PA,u-PA在天疱疮发病机理中的...
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