（一） DNA 探针 DNA探针是最常用的 核酸 探针，指长度在几百 碱基对 以上的双链DNA或 单链DNA 探针。现已获的DNA探针种类很多，有 细菌 、 病毒 、 原虫 、 真菌 、动物和人类 细胞 DNA探针，这类探针多为某一 基因 的全部或部分序列，或某一非编码序列。这些DNA片段须是特异的，如细菌的 毒力 因子 基因探针 和人类ALU探针，这些DN...
核酸 结构的基本单位是 核苷酸 （nucleicacid），每个核苷酸由1个 磷酸 、1个碳糖和1个 碱基 3部分组成。核酸有两类：一类是 脱氧核糖核酸 （ DNA ），DNA中的脱氧核糖核苷酸主要由4种碱基构成，即 腺嘌呤 (adenine,A)、 鸟嘌呤 （guanine,G）、 胞嘧啶 （cytosine,C）和 胸腺嘧啶 （thymine,T），此外...
载体（vector）是指运载外源DNA有效进入受体细胞内的工具。载体同外源DNA在体外重组成DNA重组分子，在进入受体后形成一个复制子，即形成在细胞内能独自进行自我复制的遗传因子。因此，作为载体应该满足以下几方面的要求：①有某种限制酶的一个切点，最好是有许多种限制酶的切点，而且每种酶的切点只有一个；②外源DNA插入后不影响载体在受体细胞中进行自我复制，载体应...
原位杂交 术（in situ hybridization）是一种 核酸 分子杂交 技术，它是通过检测细胞内mRNA和 DNA 序列片段，原位研究 细胞 合成某种 多肽 或 蛋白质 的基 图1－11 大鼠肝大部切除后再生过程中增殖期肝细胞 摄取 3 H标记的 胸腺嘧啶核苷 放射自显影 像 ↑ 增殖期肝细胞核 因表达。其基本原理是根据两条 单链 核苷酸 互补碱基...
组成核酸的元素有C、H、O、N、P等，其中N含量约为15%～16%，磷含量为9%～10%。由于核酸分子中的磷含量比较恒定，因此，核酸定量测定的经典方法，是以测定磷含量代表核酸量。 核酸 经水 解可得到多核苷核，因此核苷酸是核酸的基本单位，核酸就是由很多单核苷酸聚合形成的多核苷酸，核苷酸可被水解产生核苷和磷酸，核苷还可进一步水解，产生戊糖和含氮碱。因此，核酸是...
核酸又称多核苷酸，组成DNA的脱氧核糖核苷酸主要为四种，即dAMP、dGMP、dCMP及dTMP；组成RNA的核糖核苷酸主要有AMP、GMP、CMP及UMP四种。对两种核酸的组成可简写如下： DNA=（碱基-脱氧核糖-磷酸）n；RNA=（碱基-核糖-磷酸）n 核酸中核苷酸的连接方式为：一个核苷核C-3’上羟基与下一个核苷核酸C-5’连接在磷酸羟基 脱水 缩合...
天然DNA分子的长度可达几厘米，而分子直径只有2nm。如此细丝状的双螺旋结构使DNA分子具有一系列理化特性。如粘度极大，在外力作用下易断裂等。 （一）核酸的分子大小与粘度 天然DNA的分子量极大，例如，果蝇巨染色体只有一线形DNA，长达四厘米，分子量约为8×102道尔顿。高分子溶液的粘度比一般溶液的粘度要大得多，不规则团分子比球状分子的粘度要大，而线形分子的...
是将 细菌 从培养平板转移到 硝酸 纤维素滤膜上，然后将滤膜上的 菌落 裂菌以释出DNA。将NDA烘干固定于膜上与32P标记的 探针 杂交， 放射自显影 检测菌落杂交信号，并与平板上的菌落对位。
杂交瘤抗体技术的基本原理是通过融合两种细胞而同时保持两者的主要特征。这两种细胞分别是经抗原免疫的小鼠细胞作小 鼠骨 髓瘤细胞。脾淋巴细胞的主要特征是它的抗体分泌功能和能够在选择培养基中生长（选择原理后见），小鼠骨髓瘤细胞则可在培养条件下无限分裂、增殖，即所谓永生性。在选择培养基的作用下，只有B细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交才具有持续增殖的能力，形成同时具备抗体分...
（一）小鼠BALB/C系 它是此技术中最常用的动物。目前用于细胞融合的小 鼠骨 髓瘤细胞几乎都来源于BALB/C系小鼠。其杂交瘤可接种于BALB/C或它的杂交第1代小鼠，从带瘤动物取血清或 腹水 制备单克隆抗体。 BALB/C系小鼠起源于Bagg从1913年开始维持的白化株（Albine stock）小鼠，Dowell从1923年开始作近交系培育，至1932...
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