聚合酶链反应（PCR）或称体外基因倍增技术，它利用一对位于待扩增的DNA序列两端的取向相对的DNA引物，在DNA聚合酶的介导下，经过多次变性，退火和延伸过程的重复性循环，大量合成靶DNA序列。在标记dNTP存在时，经PCR反应产生的靶DNA片段均参入了标记物，用此法标记的探针标记率高达97.4%。此法重复性好，简便、快速、特异、不要求模板DNA的纯度，可以大...
...DNA上的一个片段作为DNA引物，以环化探针DNA的重组质粒DNA为模板，在DNA聚合酶的作用下，通过变性，退火和延伸过程，使探针DNA得到标记。反应在0.5ml离心管内进行，总体积为25μl，内含50mmol/l Tris—HCl pH7.5, 10mmol/L MgCl 2 、BSa 5mmol/L、80ng引物DNA和0.1μg连接的DNA或0.1μg...
...次固定液，过夜。 （2）随后，作10～40μm的冰冻切片，放入第一抗体血清作用12～18h，4℃，用含蔗糖的PBS洗数次。 （3）置于HRP标记抗体液（第二抗体）4 ℃ 过夜。然后用4℃含蔗糖PBS反复冲洗数次。4 ℃ 浸漂过夜。 （4）2.5%戊二醛（pH7.4磷酸缓冲液）再固定1h，4 ℃ 用含蔗糖PBS反复冲洗去戊醛，每次5min，共洗3次。 （5）D...
标记基因 原本是 基因工程 的专属名词，但是现在它已经成为一种基本的实验工具，广泛应用于 分子 生物学 、 细胞生物学 、发育生物学等方面的研究。 标记基因是一种已知功能或已知序列的 基因 ，能够起着特异性标记的作用。在基因工程意义上来说，它是 重组 DNA载体的重要标记，通常用来检验转化成功与否；在 基因定位 意义上来说，它是对目的基因进行标志的工具，通常...
梅毒螺旋体 不能进行体外培养。检测临床 标本 中梅毒螺旋体最敏感、可靠的方法是兔 感染 试验（RIT），RIT能证实活的梅毒螺旋体存在，是检测梅毒螺旋体常用的标准方法。然而用RIT对 新生儿 或成人 梅毒 进行常规诊断不切合实际。梅毒的 血清学诊断 对确定感染及治疗很有意义，但对 早期梅毒 诊断不敏感，对先天性及 神经 性梅毒的诊断不够特异。 血清学 试验用...
...色变，甚至不再吃与禽类相关的食物。对于禽流感我们要重视但不用恐惧它。”张鹤晓在接受记者采访时，侃侃而谈，“因为早在2001年我们就开始禽流感技术的研究并获得成功。不但把检测时间从原来的3周缩短到4小时，而且实现了养殖场环境的安全控制。” 据介绍，过去由于禽肉中禽流感病毒的快速检测技术没解决，对禽流感检测最常用的方法是世界动物卫生组织推荐的鸡胚病毒分离法。由于...
...入5～20μg）溶于二甲亚砜（1mg/ml）,取此溶液300μl，一滴一滴加入蛋白质溶液中，同时电磁搅拌。 （3）在室温中搅拌2h，避光。 （4）把结合物移入直径3cm,高30cm大小的Bio –Gel P-6层析柱（用0.01mol/l pH8.0的PBS平衡过），流速为1.5ml/min。 （5）收集先流出的红色结合物，即为标记抗体，分装，4℃保存备用。
...min；三蒸水补足体积至49μl，DNA聚合酶i 5u，混匀，14℃过夜，加0.5mmol/l ED-TA(Ph8.0)1μl终止反应。 已标记探针的提纯：10mg/ml tRNA 2μl,10mmol/L Tris –HCl (pH7.5)150μl,2.5倍体积的95%乙醇，置液氮中15min或-20℃过夜。15000r/min，离心10min，真空干燥...
...刷状缘等出现阳性荧光，这是所谓异嗜性抗体（Heterophile anti－body），它和自身抗体易发生混淆，必须注意区分。 免疫细胞化学技术在自身免疫性疾病诊断中以免疫荧光技术应用最广泛，但应用免疫酶技术和免疫金-银技术也可以取得良好结果，作用用 葡萄 菌A蛋白的 辣根 过氧化物酶标记物代替荧光抗体作自身抗体检测，所得到的结果可用光学显微镜检查，适于在没...
...规工作中都要进行大量酶的测定。但要作好酶的测定不是一件很容易的事，因为它有很多与其它定量测定不同或独特之处，作好酶的测定除了必须掌握一般分析技术知识外，还须了解酶测定的特点、方法分类和各类方法的优缺点，然后根据各自实验室情况、研究目的和临床需要，才能设计和应用好各个具体的酶测定方法，创造性地作好酶的测定。 目前常用于酶定量测定的方法是测量酶的活性浓度，此方法...
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