...混合取0.1ml池水,其中含有40个分子的DNA,用PCR扩增即已可呈阳性,这一点对检测HIV更为重要。常规只要15个拷贝的核酸即可查出。假阳性结果往往来自痕量污染和交叉污染,尤其在待扩增靶序列浓度低的情况下,更有必要采取防备措施。(1)...
...障碍性贫血发生。突变类型检测可用核酸测序,人工合成寡核苷酸探针作产前诊断。前者多用于研究,后者可应用于临床。现可利用PCR法扩增突变区域,再行测序或杂交分析,大大提高了灵敏度和特异性,可省去目的基因的克隆,方法也得到一定的简化。⒋密码子缺失和...
...(一)基本原理在地高辛标记核酸探针广泛用于光镜水平的原位杂交试验并获极为满意的结果后,科学工作者试图将其应用于电镜水平。其基本原理和生物素标记核酸探针-PA-Gold电镜杂交技术的基本原理相似,首先利用地高辛修饰核酸探针,与细胞或组织进行...
...玫瑰花形成试验,淋巴细胞转化试验,血液淋巴细胞计数,T淋巴细胞计数及用单克隆抗体检测T细胞亚群以了解各亚群T细胞数和比例。4.分子生物学检测利用同位素32P或生物素标记的分子探针可以检出特异性的病毒核酸。近年发展起来的聚合酶链反应技术(...
...玫瑰花形成试验,淋巴细胞转化试验,血液淋巴细胞计数,T淋巴细胞计数及用单克隆抗体检测T细胞亚群以了解各亚群T细胞数和比例。4.分子生物学检测利用同位素32P或生物素标记的分子探针可以检出特异性的病毒核酸。近年发展起来的聚合酶链反应技术(...
...聚合酶链反应(PCR)或称体外基因倍增技术,它利用一对位于待扩增的DNA序列两端的取向相对的DNA引物,在DNA聚合酶的介导下,经过多次变性,退火和延伸过程的重复性循环,大量合成靶DNA序列。在标记dNTP存在时,经PCR反应产生的靶...
...臂一、长臂三,中间象个工字般。(二)染色体G显带技术1.原理染色体的化学成份是核酸和蛋白质两部分。核酸以DNA为主,蛋白质有组蛋白和非组蛋白两种。因此染色体经蛋白水解酶类物质处理后,蛋白质已被水解而使DNA分子中碱基暴露,由于碱基中G/C和...
...从生物组织细胞提取出全部DNA,用物理方法(超声波、搅拌剪力等)或酶法(限制性核酸内切酶的不完全酶解)将DNA降解成预期大小的片段,然后将这些片段与适当的载体(常用噬菌体、粘粒或YAC载体)连接,转入受体细菌或细胞,这样每一个细胞接受了...
...标记和检测 三、核酸分子杂交方法 第三节 基因扩增技术(PCR) 一、PCR的基本原理和基本程序 二、PCR的特点 三、PCR方法 四、PCR反应的基本条件及其对PCR的影响 五、PCR标本的制备 六、PCR实验中常见问题对策 七、PCR扩增...
...的种类 ◦ 二、核酸探针的标记和检测 ◦ 三、核酸分子杂交方法 第三节 基因扩增技术(PCR) ◦ 一、PCR的基本原理和基本程序 ◦ 二、PCR的特点 ◦ 三、PCR方法 ◦ 四、PCR反应的基本条件及其对PCR的影响 ◦ 五、PCR标本...
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