...将会降低杂交温度所需要的37℃,因此,建议对盖片应用前在37℃进行预热。(3)用免疫细胞化学或组织化学方法显示荧光标记。自80年代以来,荧光素标记检测系统日益增加。包括:①生物素标记探针与荧光素标记的抗生物素(avidin)或抗生物素抗体。...
...一种检验方法从建立到临床应用涉及许多因素,关键是临床需要和质量可靠,结果可信、实用二个方面。随着对发病机制研究的不断深入,在分子水平诊断、治疗、预后疾病已为人们所认识。分子生物学技术一般操作较复杂,成本较高,质控较差,但它在基因分子水平...
...一种检验方法从建立到临床应用涉及许多因素,关键是临床需要和质量可靠,结果可信、实用二个方面。随着对发病机制研究的不断深入,在分子水平诊断、治疗、预后疾病已为人们所认识。分子生物学技术一般操作较复杂,成本较高,质控较差,但它在基因分子水平...
...一些从不吸烟的人为何也会患肺癌?美国和日本的科研人员在最新研究中发现,这可能与一种被称为miR-21的微RNA(核糖核酸)分子有关。 微RNA分子是能调节基因表达的一种小分子,目前已发现超过250种,其中多种与癌症有关,miR-21正是...
...100万个片段,多的可达1000万个片段。如果其中有一、二个片段发生改变,不可能从电泳凝胶上直接观察分辨。此时就必定要用合适的探针。某个目的基因或某一特定的DNA片段,在同酶切后的DNA作分子杂交后,可在曝光的X线片上看到RFLP。图23-...
...RFLP分析是限制性内切酶、核酸电泳、印迹(blot)技术、探针-杂交技术的综合应用,多用于临床遗传性疾病的基因诊断。基本原理是遗传性疾病多有基因的缺陷,如基因缺失、基因插入、编码区小范围核苷酸序列改变或点突变等。前二者可将纯化的正常人和...
...短的重复顺序分别长16、17、32、33、37、41、62、64和376bp,但这些重复顺序几乎都共有一种“核心顺序”。“核心顺序”长10~15bp。如果人工合成很短的重复顺序作为DNA分子杂交的探针,同经限制性内切酶酶切的人体DNA作...
...Phycoerythrin)应用效果较差,可能由于分子大的缘故。可同时应用AAF和生物素标记系统及汞与生物素系统分别应用不同的荧光素去标记两条DNA进行双重染色。3.基本操作方法(1)玻片准备:细胞用甲醇:醋酸(3:1)固定,滴在玻片上可保存在-20℃,如将此...
...高血脂症、甚至肿瘤中的一部分,均是当前研究的重点,近期内可望有突破。2.致病病原体的检测 这些外源入侵的基因,一旦阐明其部分核酸序列,就可以设计引物或探针,用PCR、PT-PCR或杂交方法来检测,其范围包括细菌、病毒、原虫及寄生虫、霉菌、立克次体...
...酶复合物。以上反应AP亦可用HRP代替。表18-3曱核酸探针的标记分子标记物性质标记分子标记方法杂交体的检测法放射性分子[α-32P]dNTPNT、PCR、RPI放射自显影或计数 [γ-32P]dNTPTL放射自显影或计数 125I碘化放射...
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