一种检验方法从建立到临床应用涉及许多因素，关键是临床需要和质量可靠，结果可信、实用二个方面。随着对发病机制研究的不断深入，在分子水平诊断、治疗、预后疾病已为人们所认识。分子生物学技术一般操作较复杂，成本较高，质控较差，但它在基因分子水平揭示发病的机制及本质、诊断、治疗疾病的媚力不可抗拒，人们正在努力改进技术以便符合临床要求。如PCR技术的出现，立即得到临床的...
新华社北京10月31日电(记者李斌、吴晶晶)核酸干扰技术(RNAi)是近年来蓬勃发展的生物前沿技术。中国科学院生物物理研究所的科学家利用这一技术在动物身体上对乳腺癌实施治疗，取得了显着效果。这一研究成果近日发表在国际核心期刊《癌基因治疗》上。 上个世纪末，科学家发现了核酸干扰系统(RNAi)，又称基因免疫系统。基因免疫和抗体免疫、细胞免疫共同构筑起动植物抗御...
载体（vector）是指运载外源DNA有效进入受体细胞内的工具。载体同外源DNA在体外重组成DNA重组分子，在进入受体后形成一个复制子，即形成在细胞内能独自进行自我复制的遗传因子。因此，作为载体应该满足以下几方面的要求：①有某种限制酶的一个切点，最好是有许多种限制酶的切点，而且每种酶的切点只有一个；②外源DNA插入后不影响载体在受体细胞中进行自我复制，载体应...
凝集素的特性及标记原理详见第五章 ，近年来，凝集素电镜标记技术应用日益广泛，且获得较为满意的效果。凝集素电镜标记技术方法较多，常用的有凝集素—酶（常用为HRP）、凝集素—生物素—酶电镜标记技术。现将凝集素—酶电镜标记技术（包埋前染色）简介如下（Sterit 和Kreatzberg,1987）。 （1）固定：常用为PLP或多聚甲醛—戊二醛固定液。如为取脑组织，...
...原料，沿模板以5’→3’方向延伸，合成DNA新链。这样，每一双链的DNA模板，经过一次解链、退火、延伸三个步骤的热循环后就成了两条双链DNA分子。如此反复进行，每一次循环所产生的DNA均能成为下一次循环的模板，每一次循环都使两条人工合成的引物间的DNA特异区拷贝数扩增一倍，PCR产物得以2 n 的批数形式迅速扩增，经过25～30个循环后，理论上可使基因扩增1...
核酸是生物体内的高分子化合物，包括DNA和RNA两大类。
体细胞杂交 （comatic cell hybridization）：又称 体细胞 融合，指将两个GT不同的体细胞融合成一个体 细胞 的过程。融合形成的杂种细胞，兼有两个细胞的 染色体 。
1．原理染色体的化学成份是核酸和蛋白质两部分。核酸以DNA为主，蛋白质有组蛋白和非组蛋白两种。因此染色体经蛋白水解酶类物质处理后，蛋白质已被水解而使DNA分子中碱基暴露，由于碱基中G/C和A/T组合的比例不同，对染料结合的程度不一，如这一段A/T碱基的成份多，则Giemsa染料易与它结合成深染；另一段G/C碱基的成份多，则Giemsa染料不易与其结合，结果成...
是指将待测的DNA变性后点加在 硝酸 纤维素膜（或 尼龙 膜,NC膜）上，用已标记的 探针 进行杂交，洗膜(除去未接合的探针)， 放射自显影 ，判断是否有杂交及其杂交强度，主要用于 基因 缺失或拷贝数改变的检测。 斑点杂交 （Dot blot）是将被检 标本 点到膜上，烘烤固定。这种方法耗时短，可做半定量分析。一张膜上可同时检测多个样品，为使点样准确方便，市...
原位杂交 术（in situ hybridization）是一种 核酸 分子杂交 技术，它是通过检测细胞内mRNA和 DNA 序列片段，原位研究 细胞 合成某种 多肽 或 蛋白质 的基 图1－11 大鼠肝大部切除后再生过程中增殖期肝细胞 摄取 3 H标记的 胸腺嘧啶核苷 放射自显影 像 ↑ 增殖期肝细胞核 因表达。其基本原理是根据两条 单链 核苷酸 互补碱基...
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