生物素标记核酸探针方法_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

生物素标记的核苷酸是最广泛使用的一种,如生物素-11-dUTP,可用缺口平移或末端加尾标记法。实验发现生物素可共价连接在嘧啶环的5位上,合成TTP或UTP的类似物。在离体条件下,这种生物素化dUTP可作为大肠杆菌多聚酶I(DNA酶I)的底物掺入带有缺口的DNA或RNA,得到生物素标记的核酸探针。这种标记方法称为缺口平移法。用标记在DNA上的生物素与链霉亲合素...

http://qihuangzhishu.com/969/519.htm

免疫技术发展史_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...的结构和金属性质。在1939年Kausche和Ruska把 烟草 花叶 病毒吸附到金颗粒上在电子显微镜下观察见金离子呈高电子密度。然而胶体金技术作为标记物应用于免疫组织化学研究是在1971年,Faulk 和Taylor首先将兔抗沙门氏菌抗血清与胶体金颗粒结合,用直接免疫细胞化学技术检测沙门氏菌的表面抗原。此后,他们还把胶体金与抗胶原血清,植物血凝素,卵白蛋白...

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器官特异性及其它瘤标记物_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

如前所述,若我们把角蛋白视为上皮性肿瘤的共性免疫标记物,则对不同器官的上皮性肿瘤具有特别或优先识别作用的标记物,可看作为器官特异性或相对特异性标记物。经过长期实践的检验,一些上皮器官特异性标记物已为人们所接受。此外,也发出了一些效果较肯定、特异性较好、诊断作用较明确的新的标记物。现将其生物化学本质、肿瘤表达情况及诊断应用附表如下(表12-5),并将其在上皮组...

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研究LC自身的表面标记_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

应用免疫细胞化学技术进一步研究LC表面受体或表面分子,以加深对LC功能特性的认识。通过单克隆体免疫细胞化学及RT-PCR(reverse transcriptase –ploymerase chain reaction ) 技术证实,新鲜分离的人LC能显示2种FcεRII:一种是膜相关型,可用单抗CD 12 检出;另一种为可溶性分泌型,可用RT-PCR证实。...

http://qihuangzhishu.com/969/455.htm

放射性同位素标记核酸探针_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

最常用的同位素是α- 32 PdNTP, 3 HdNTP,及 35 SdNTP,多用缺品平移法、末端标记法,随机引物延伸法和反转录标记法。在以mRNA制备cDNA时,同时掺入标记的脱氧核苷酸,制出cD-NA标记探针。

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光敏生物素标记核酸探针_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...见光照射下,芳基叠氮化合物可能变成活化芳基硝基苯,很易与DNA或RNA的腺嘌呤N—7位置特异结合,大约每50个碱基结合一个生物素,所以只用于标记大于200个核苷酸的片段。光敏生物素的醋酸盐很易溶于水,与核酸形成的共价结合很稳定。此法有以下优点:方法简便易行,快速省时,不需昂贵的酶和dUTP等;只需光照,探针稳定,-20℃可保存12个月以上。适用于DNA和RN...

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胶体金标记物的制备_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

胶体金标记蛋白质的原理,一般认为是由于pH值等于或稍偏碱于蛋白质等电点时,蛋白质呈电中性,此时蛋白质分子与胶体金颗粒相互间的静电作用较小,但蛋白质分子的表面张力却最大,处于一种微弱的水化状态,较易吸附于金颗粒的表面,由于蛋白质分子牢固地结合在金颗粒的表面,形成一个蛋白层,阻止了胶体金颗粒的相互接触,而使胶体金处于稳定状态,如果=低于蛋白质的等电点时,蛋白质带...

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四乙基罗达明标记抗体方法_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

取1g RB200及PCL52g放在乳钵中研磨5min(在通风橱中)。然后加入10ml无水丙酮,放置5min,不断搅拌。过滤,用滤液进行标记抗体。剩余部分吸附在滤纸上,4℃干燥保存。 取抗体(20mg/ml)每毫升加入生理盐水和0.5mol/l pH9.0的碳酸盐缓冲液各1ml稀释。逐滴加入0.1ml RB200溶液,边加入边搅拌,在0~4℃中结合12~18...

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发光免疫技术_《免疫学和免疫学检验》在线阅读_【中医宝典】

发光免疫技术是将发光系统与免疫反应相结合,以检测抗原或抗体的方法。其既具有免疫反应的特异性,更兼有发光反应的高敏感性,在免疫学检验中应用日趋广泛。

http://zhongyibaodian.com/mianyixuehemianyixuejianyan/1016-23-0.html

生物素随机引物标记探针方法_《实用免疫细胞与核酸》_中医杂集书籍_【岐黄之术】

...至48μl,加DNA聚合酶(SABC)8u,混匀,37 ℃ ,2h,加0.5mol/l EDTA(Ph8.0)2μl,终止反应。 在随机引物标记体系中,加入不同梯度浓度比值的Bio-11-dUTP/dTTP(%),发现二者比值明显影响探针标记率和显色灵敏度。Bio-11-Dutp/dTTP(%)比值为35%时,其标记率最高,显色灵敏度达0.2pg,杂交灵敏度...

http://qihuangzhishu.com/969/524.htm

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