c-erbB-2基因又称为neu或HER-2基因,是一种细胞来原癌基因,在多种肿瘤中其癌基因及其蛋白产物(P185)均有过度表达和扩增。对c-erbB-2癌基因蛋白产物P185的病理研究首先多见于 乳腺癌 ,其作用也较为明确。目前普遍认为,c-erbB-2蛋白产物的阳性表达可作为判断乳腺癌预后的一个独立指标。
c-erbB-2基因又称为neu或HER-2基因,是一种细胞来原癌基因,在多种肿瘤中其癌基因及其蛋白产物(P185)均有过度表达和扩增。对c-erbB-2癌基因蛋白产物P185的病理研究首先多见于 乳腺癌 ,其作用也较为明确。目前普遍认为,c-erbB-2蛋白产物的阳性表达可作为判断乳腺癌预后的一个独立指标。
(一) 试剂 (1) 引物 :决定 扩增 的特异性。根据检测的 DNA 不同,选用不同引物,每种病原微生 物都有自己特异的引物。 (2)耐热的DNA 聚合酶 :此酶是从耐热 细菌 中分离出来的,能耐受高温90℃-100℃。 (3)10×PCR 缓冲液 :500mmol/l KCl;100mmol/LTris-HCl(pH8.4,20℃)150mmol/L M...
...用日益广泛。 DNA克隆技术在 动脉粥样硬化 等疾病的病因及诊疗研究中也有重要的作用。例如在研究脂蛋白酯酶基因发生的特异突变时,可以设计合成扩增引物,进行模板DNA的PCR扩增,所得的PCR产物较小,仅有300多bp,且纯度不足以进测序。为了对此突变序列进行测序分析,就可以采用DNA克隆的方法,将此PCR产物连接到细菌质粒上,再进一步纯化后测序,以便鉴定脂蛋...
...用日益广泛。 DNA克隆技术在 动脉粥样硬化 等疾病的病因及诊疗研究中也有重要的作用。例如在研究脂蛋白酯酶基因发生的特异突变时,可以设计合成扩增引物,进行模板DNA的PCR扩增,所得的PCR产物较小,仅有300多bp,且纯度不足以进测序。为了对此突变序列进行测序分析,就可以采用DNA克隆的方法,将此PCR产物连接到细菌质粒上,再进一步纯化后测序,以便鉴定脂蛋...
...用日益广泛。 DNA克隆技术在 动脉粥样硬化 等疾病的病因及诊疗研究中也有重要的作用。例如在研究脂蛋白酯酶基因发生的特异突变时,可以设计合成扩增引物,进行模板DNA的PCR扩增,所得的PCR产物较小,仅有300多bp,且纯度不足以进测序。为了对此突变序列进行测序分析,就可以采用DNA克隆的方法,将此PCR产物连接到细菌质粒上,再进一步纯化后测序,以便鉴定脂蛋...
(一)试剂 (1)引物:决定扩增的特异性。根据检测的DNA不同,选用不同引物,每种病原微生 物都有自己特异的引物。 (2)耐热的DNA聚合酶:此酶是从耐热细菌中分离出来的,能耐受高温90℃-100℃。 (3)10×PCR缓冲液:500mmol/l KCl;100mmol/LTris-HCl(pH8.4,20℃)150mmol/L MgCl2,1mg/ml 明...
...用日益广泛。 DNA克隆技术在 动脉粥样硬化 等疾病的病因及诊疗研究中也有重要的作用。例如在研究脂蛋白酯酶基因发生的特异突变时,可以设计合成扩增引物,进行模板DNA的PCR扩增,所得的PCR产物较小,仅有300多bp,且纯度不足以进测序。为了对此突变序列进行测序分析,就可以采用DNA克隆的方法,将此PCR产物连接到细菌质粒上,再进一步纯化后测序,以便鉴定脂蛋...
反向PCR的目的在于扩增一段已知序列旁侧的DNA,也就是说这一反应体系不是在一对引物之间而是在引物外侧合成DNA(见图22-2)。反向PCR可用于研究与已知DNA区段相连接的未知染色体序列,因此又可称为染色体缓移或染色体步移。这时选择的引物虽然与核心DNA区两末端序列互补,但两引物3’端是相互反向的。扩增前先用限制性内切酶酶切样品DNA,然后用DNA连接酶连...
PCR温度循环至关重要,PCR扩增仪各参数必须准确。自Perkin –Elmer Cetus公司第一台PCR扩增仪问世以来,现已有几十家不同的厂家在国内外生产和销售PCR扩增仪。在短短的几年间,扩增仪经过几代的发展,不断采用新技术,并且进一步朝方便、实用、高智能化和自动化的方向发展。 为了便于了解和选购适宜的PCR实验设备,现将部分国内外PCR扩增仪列表如下...
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