LP-PCR(Labelled Primers PCR)是利用同位素、荧光素等对PCR引物5’端进行标记,据此检测目的基因的存在与否,与常规PCR相比更为直观,省去了限制性内切酶酶切及分子杂交等繁琐步骤,而且一次可以同时分析多种基因成分,因而特别适合于大量临床标本的基因诊断。目前该方法只对PCR产物进行定性鉴定。 彩色PCR(Colorcomplement ...
1.ICC与荧光抗体法结合 首先染色显示A抗原,DAB/H2O2呈色,继之用间接(直接)荧光抗体法显示B抗原,于光镜和荧光显微镜下观察,比较两种抗原的分布。因DAB终产物能够沿其表面向周围迁移,尤其是DAB浓度略高、反应时间稍长时,形成的终产物较大,可以遮盖该抗原抗体的反应部位,故两种染色间很少出现交叉反应。该双重染色的方法主要适于显示两种抗原分布不同细胞内...
在不同的肾脏疾病时,荧光标记抗体或免疫酶标记抗体在肾脏内显示的部位、分布情况和型式(pattern)皆有所不同。现根据其在肾脏内显示的不同部位叙述如下:
应当根据设备条件,具备的抗体和示踪抗原的特点进行选择。我们的经验是:因胞浆性抗原含量较多,可以用简便和廉价的间接法甚至直接法免疫细胞化学染色;对膜抗原及其它一些微量抗原应当选用PAP或ABC法,如果同时进行两种以上抗原的检查,最好进行双标记和多标记免疫细胞化学染色;为了显示较弱的抗原,可以用对比染色技术,背景为另一种颜色,使阳性抗原着色更突出。
(1)新鲜或固定的细胞进行直接法或间接法免疫标记。 (2)PBS(pH7.5)冲洗3min×2,加入1mmol/l MgCl 2 蒸馏水洗洗3min×3,离心沉集细胞。 (3)将细胞团置于小纸板上,入液氮冷却的Freon中,取出入冷冻蚀刻仪中进行断裂操作,再于-100 ℃ 蚀刻1min 。 (4)制做断裂面复型。 (5)再次氯酸钠清洗复型,蒸馏水洗后进行观察...
荧光素酶 (英文名称:Luciferase)是自然界中能够产生生物荧光的酶的统称,其中最有代表性的是一种 学名 为Photinus pyrali'的萤火虫体内的荧光素酶。在相应化学反应中,荧光的产生是来自于萤光素的氧化,有些情况下反应体系中也包括 三磷酸腺苷 (ATP)。没有荧光素酶的情况下,萤光素与氧气反应的速率非常慢,而钙离子的存在常常可以进一步加速反应...
显微和超显微制片技术步骤之一。为了便于在 显微镜 下观察,利用各种 染色 剂化学性质的不同,使 组织切片 内部的不同结构分别着色。 细胞 染色 染色是生物显微玻片 标本 制作中最重要的环节之一。通过染色,将生物组织浸入染色剂内,使组织细胞的某一部分染上与其他部分不同的颜色或深度不同的颜色,产生不同的 折射率 ,以便观察。 最常用的是 苏木精 和 伊红 染色法...
用于 软组织肿瘤 可在石蜡切片表达的抗体已有多种,请参见表12-1。 表12-1 软组织细胞可用的标记抗体 抗原名称 标记细胞 (1)角蛋白(Keratin) 上皮与肌上皮细胞 (2)波纹蛋(Vimentin) 间叶分化细胞、内皮细胞 (3)结蛋白(Desmin) 肌组织分化细胞 (4)肌动蛋白(Actin) 肌细胞,肌上皮细胞,肌纤维 (5)肌浆球蛋白(M...
在不同的肾脏疾病时,荧光标记抗体或免疫酶标记抗体在肾脏内显示的部位、分布情况和型式(pattern)皆有所不同。现根据其在肾脏内显示的不同部位叙述如下:
...性组织与一般间叶性细胞构成。后者与前述 软组织肿瘤 相一致。总体上看骨肿瘤是在间叶组织基础上的特殊性肿瘤。现重点将成骨,成软骨及破骨性肿瘤的免疫细胞化学标记予以讨论。 1.良性骨与软骨肿瘤它们存在诊断上的困难是低分化的骨与 软骨肉瘤 与间叶性血管外皮瘤,巨细胞瘤,“恶纤组”等不易区别。尤其是 骨肉瘤 有骨母细胞性,软骨母细胞性,成纤维细胞性, 毛细血管扩张 ...
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