...-)又称异羟基洋 地黄 毒甙配基,这种类固醇半抗原仅限于 洋地黄 类植物,其抗体与其它任何固醇类似物如人体中的性激素等无交叉反应,地高辛配基标记于脱氧尿嘧啶三磷酸核苷(dUTP)上形成digoxigenin –11-dUTP(图20-3)。通过随机引物或缺口翻译法(多用随机引物法),将dig-11-dUTP与探针的核酸分子相连,构成Dig-配基标记的核酸探针...
...mg/ml,缓冲液容量为总量的1/10,混匀,将三角烧瓶置冰槽中,电磁搅拌(速度适当以不起泡沫为宜)5~10min。 ②荧光素的准备:根据欲标记的蛋白质总量,按每毫克蛋白加0.01mg 荧光素,用分析天平准确称所取所需的异硫氰酸荧光素粉末。 ③结合(或称标记):边搅拌边将称取的荧光色素渐渐加入球蛋白溶液中,避免将荧光素粘于三角烧瓶壁或搅拌玻棒上(大约5~10...
从本质上说,药物都是化学物质,其检测方法均为临床化学的常用技术。但体液中的药物大多以μg/ml或ng/ml水平存在,并且其检测不仅受同时存在的多种结构相似的内源性物质干扰,还受和原型药仅有微小差别的代谢物干扰。而某些药物的TDM除原型药外,还需同时检测具药理活性的代谢物。另一方面,药物的有效浓度范围和中毒水平,是结合大量临床观察确定的,要求任何实验室建立的测...
用放射免疫分析进行测定时分三个步骤,即抗原抗体的竞争抑制反应、B和F的分离及放射性的测量。 (一)抗原抗体反应 将抗原(标准品和受检标本)、标记抗原和抗血清按顺序定量加入小试管中,在一定的温度下进行反应一定时间,使竞争抑制反应达到平衡。不同质量的抗体和不同含量的抗原对温育的温度和时间有不同的要求。如受检标本抗原含量较高,抗血清的亲和常数较大,可选择较高的温度...
一、原理 应用比色分析测定溶液中伯的含量有 硫氰酸盐 显色法、磺基 水杨酸 法及邻菲罗啉显色法等各各种方法。现以磺基水杨酸法为例介绍铁的含量测定。 在不同酸度下,Fe3+和磺基水杨酸生成组成不同的配合物。若控制溶液PH值在8-11.5的条件下显色,可生成 配位数 为6的黄色三磺基水杨酸合铁配合物。反应式如: 上式可简写为 溶液的最大吸收波长λmax=420n...
绪论 免疫学基础 第一章 抗原 第一节 免疫原性基础 第二节 抗原特异性基础 一、半抗原与载体 二、天然抗原的表位 第三节 抗原的类型 一、诱导免疫应答的性能 二、与宿主亲缘相关性 三、其他分类方法 第二章 免疫球蛋白 第一节 免疫球蛋白的化学 第二节 免疫球蛋白的血清型 第三节 免疫球蛋白的生物学活性 第四节 各类免疫球蛋白的特点 第五节 免疫球蛋白的基因...
由于酶标抗体存在一些缺点,例如①酶与抗体间的共价连结可损害部分抗体和酶的活性;②抗血清中的非特异性抗体被酶标记后,与组织成分结合,可致背景染色等。为此Sternberger等在酶标法的基础上,发展了非标记抗体酶法。包括酶桥法(Enzyme Bridge Method)和过氧化物酶抗过氧化物酶法(PeroxidaseAntiperoxidase Method,...
自旋标记 spin label 自旋标记 spin label 很多物质的 分子 不表现 电子自旋共振 (ESR),但对这些分子,人工地使之与 自由基 (free radical)结合从而得以用ESR法来研究,获得独特的ESR信息,这就是 自旋标记法 。因自由基有不成对电子自旋,所以称自旋标记(H.M.McConnell)。开始是用 氯丙嗪 阳离子自由基研究...
最常用的同位素是α- 32 PdNTP, 3 HdNTP,及 35 SdNTP,多用缺品平移法、末端标记法,随机引物延伸法和反转录标记法。在以mRNA制备cDNA时,同时掺入标记的脱氧核苷酸,制出cD-NA标记探针。
...见光照射下,芳基叠氮化合物可能变成活化芳基硝基苯,很易与DNA或RNA的腺嘌呤N—7位置特异结合,大约每50个碱基结合一个生物素,所以只用于标记大于200个核苷酸的片段。光敏生物素的醋酸盐很易溶于水,与核酸形成的共价结合很稳定。此法有以下优点:方法简便易行,快速省时,不需昂贵的酶和dUTP等;只需光照,探针稳定,-20℃可保存12个月以上。适用于DNA和RN...
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