...以生物素标记抗体作第一抗体，酶标记抗生物素作为第二抗体（图6-3）。操作步骤如下：图6-3 LAB技术（1）切片在含有25～50μg/ml生物素标记抗体（PBS液稀释）中孵育1h，室温。（2）PBS洗2次，每次5min。（3）用20～50...
...32P]dCTp 1.5×106Bq，dATp 、dGTP和dTTP各200μmol/L。标记反应包括3个步骤：（1）变性：反应管在95℃水浴5min，然后离心；（2）退火：37℃水浴2min；（3）延伸：加入DNA聚合酶i 1u，37℃水浴...
...细胞内碱性磷酸酶含量低或因某些未死亡细胞能自行释放，从而影响法灵敏度和特异性。此外乳酸脱氢酶分子较大，仅当靶细胞膜完全被破坏时才释放，故不能较早地反映效应的功能。（三）荧光法检测原则是用荧光素标记靶细胞，经与效应细胞共温后，离心法上清，用荧光...
...细胞内碱性磷酸酶含量低或因某些未死亡细胞能自行释放，从而影响法灵敏度和特异性。此外乳酸脱氢酶分子较大，仅当靶细胞膜完全被破坏时才释放，故不能较早地反映效应的功能。（三）荧光法检测原则是用荧光素标记靶细胞，经与效应细胞共温后，离心法上清，用荧光...
...纵坐标，蛋白质用量为横坐标作一曲线，取曲线最先与横轴相接近的那一点处的蛋白质用量为最适稳定量。图5.2中10nm的胶体金溶液中蛋白质的最适稳定量为45μg/ml。图5-2 蛋白最适稳定量示意图（2）目测法：以目测法确定胶体金与待标记蛋白质用量...
...杀菌过程中能量消耗剧增，耗氧量亦随之相应增加，磷酸己糖旁路代谢活力增强，葡萄糖6-磷酸氧化脱氢，此时加入NBT可接受所脱的氢，使原先呈淡黄包的NBT还原成点状或块状甲朊颗粒并沉积在胞浆内。NBT还原反应式如下：近此年来还采用了新颖的化学发光法...
...杀菌过程中能量消耗剧增，耗氧量亦随之相应增加，磷酸己糖旁路代谢活力增强，葡萄糖6-磷酸氧化脱氢，此时加入NBT可接受所脱的氢，使原先呈淡黄包的NBT还原成点状或块状甲朊颗粒并沉积在胞浆内。NBT还原反应式如下：近此年来还采用了新颖的化学发光法...
...取1g RB200及PCL52g放在乳钵中研磨5min（在通风橱中）。然后加入10ml无水丙酮，放置5min，不断搅拌。过滤，用滤液进行标记抗体。剩余部分吸附在滤纸上，4℃干燥保存。取抗体（20mg/ml）每毫升加入生理盐水和0.5mol...
...（1）新鲜或固定的细胞进行直接法或间接法免疫标记。（2）PBS（pH7.5）冲洗3min×2，加入1mmol/l MgCl2蒸馏水洗洗3min×3，离心沉集细胞。（3）将细胞团置于小纸板上，入液氮冷却的Freon中，取出入冷冻蚀刻仪中进行...
...550nm，最大发射光波长为620nm，呈橙红色荧光。与FITC的翠绿色荧光对比鲜明，可配合用于双重标记或对比染色。其异硫氰基可与蛋白质结合，但荧光效率较低。（二）其他荧光物质1．酶作用后产生荧光的物质某些化合物本身无荧光效应，一旦经酶作用便...
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