...denaturedgradientgelelectrophoresis)、PCR-ASO(等位基因特异性寡核苷酸杂交,allelespecificoligonucleotide)和测序技术(sequencing):探测点突变。⑵免疫组织化学:用RAP-5单抗。⑶Southern印迹法...
...enzymelinkedimmunoelectrotransferblot,EITB),因与Southern早先建立的检测核酸的印迹方法Southernblot相类似,亦被称为Westernblot。免疫印迹法(图15-12)分三个阶段进行。第一阶段为SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(...
...RFLP分析是限制性内切酶、核酸电泳、印迹(blot)技术、探针-杂交技术的综合应用,多用于临床遗传性疾病的基因诊断。基本原理是遗传性疾病多有基因的缺陷,如基因缺失、基因插入、编码区小范围核苷酸序列改变或点突变等。前二者可将纯化的正常人和...
...诞生,现在可常规制备18~100个碱基的寡核苷酸探针。应用限制酶和Southern印迹技术,用数微克DNA就可分析特异基因。特异DNA或RNA序列的量和大小均可用Southern印迹和Northern印迹来测定,与以前的技术相比,大大提高了...
...大部分人体载脂蛋白基因的染色体定位采用了两种方法:DNA印迹法(Southern blotting);荧光标记原位杂交法(fluorescence insitu hybridization)。DNA印迹法主要是分析从人与老鼠或中国苍鼠体...
...denaturedgradientgelelectrophoresis)、PCR-ASO(等位基因特异性寡核苷酸杂交,allelespecificoligonucleotide)和测序技术(sequencing):探测点突变。⑵免疫组织化学:用RAP-5单抗。⑶Southern印迹法及...
...提取法还高,又不影响与32P标记的探针杂交。但它不适于非放射性标记探针,因为DNA纯度不够,会产生高本底。3.Southern印迹杂交(southern blot )Southern blot 是研究DNA图谱的基本技术,在遗传诊断DNA图谱...
...位置,有利于检出。但凝胶易碎且操作不便。英国科学家Southern首创印迹法克服了上述困难(图13-6)。 一、Southern印迹法(Southernblot)基本原理是:硝酸纤维膜或尼龙滤膜对单链DNA的吸附能力很强,当电泳后凝胶经过...
...染色体核型分析,显带技术与荧光素染色体原位杂交术(FISH)及分子技术如Southern印迹法或反转录酶链反应(RT-PCR)等不同灵敏度的检测方法测定临床诊断为CML患者的骨髓或外周血细胞,可将CML分为3类:①90%以上的CML患者为Ph...
...之间污染问题且使方法更适合于大批量标本检测。Huang等(1991)将生物素-亲和素放大技术引入Utermann法免疫印迹检测系统,使检测灵敏感大大提高,88%的受试者均可检出Apo(a)异构体区带。1990年Gaubatz等应用含0.75...
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