...述诸因素有关，但也可能由于酶稳定性下降 失活 所致，或者是二类原因之总和。通过曲线B的实验，可将上述二类原因分清。此时先将酶与不同pH底物 缓冲液 温育 一段时间，此时间一般与测定时间相当，然后再将pH调回最适pH处测其活性。从曲线B可以说在pH5-6.8以及pH6.8-8.0之间酶活性的下降与酶 灭活 关系不大，酶在最适pH处储存常数稳定。但有些酶贮存在最...
（一）缓冲液的配制 （1）0.05mol/l pH7.4 TBS 配制 Tris（三羟甲基胺基甲烷）12.1g NaCl 17.5g 加双蒸水1900ml 然后用浓HCL调至pH为7.4再加双蒸水至2000ml Tris 4.84g NaCl 17.5g BSA 2.0g NaN 3 1.0g 双蒸水1900ml,充分搅拌至溶质完全溶解,用浓HCl调pH至8...
...能与上述诸因素有关，但也可能由于酶稳定性下降失活所致，或者是二类原因之总和。通过曲线B的实验，可将上述二类原因分清。此时先将酶与不同pH底物缓冲液温育一段时间，此时间一般与测定时间相当，然后再将pH调回最适pH处测其活性。从曲线B可以说在pH5-6.8以及pH6.8-8.0之间酶活性的下降与酶灭活关系不大，酶在最适pH处储存常数稳定。但有些酶贮存在最适pH时...
（一）缓冲容量 缓冲能力的强弱，可用缓冲容量β表示。缓冲容量也叫缓冲值或缓冲指数。 如图3-1所示，对任何一种缓冲溶液的每一个PH值，都有其相应的缓冲量。缓冲容量实际上是一个微分比，可定义为：使1升缓冲溶液的PH值增高很小一个数值dPH时，需加入的强碱物质的量为db，则db与dPH之比值叫缓冲容量，用数学式表示为β=db/dPH缓冲mol.L-1.PH－1。...
...病原微生 物都有自己特异的引物。 （2）耐热的DNA 聚合酶 ：此酶是从耐热 细菌 中分离出来的，能耐受高温90℃-100℃。 （3）10×PCR 缓冲液 ：500mmol/l KCl;100mmol/LTris-HCl(pH8.4,20℃)150mmol/L MgCl2,1mg/ml 明胶 。10×PCR缓冲液随酶一起购买。 （4）5mmol/L dNTP...
此部分内容包含以下子章节，请点击标题阅读: 缓冲溶液与缓冲作用原理 缓冲溶液PH的计算 缓冲容量与缓冲范围 缓冲溶液的配制 缓冲溶液在医学上的意义
（一）缓冲作用与缓冲溶液 纯水在25℃时PH值为7.0，但只要与空气接触一段时间，因为吸收 二氧化碳 而使PH值降到5.5左右。1滴浓 盐酸 （约12.4mol.L-1）加入1升纯水中，可使［H＋］增加5000倍左右（由1.0×10-7增至5×10-4mol.L-1），若将1滴 氢氧化钠 溶液（12.4mol.L-1）加到1升纯水中，PH变化也有3个单位。可...
（一）模板 核酸 PCR可以以 DNA 或 RNA 为模板进行核酸的体外 扩增 。不过RNA的扩增首先 逆转录 成cDNA后才能进行PCR循环。不同来源的核酸 标本 必须经处理后才能用于PCR的扩增，处理不当或处理过程中DNA掉失都会导致PCR扩增失败。 采集标本 方法不当，未能获得所要检测的靶DNA都会导致出现 假阴性 。但是如果待扩增标本中模板DNA浓度...
（一）缓冲容量 缓冲能力的强弱，可用缓冲容量β表示。缓冲容量也叫缓冲值或缓冲指数。 如图3-1所示，对任何一种缓冲溶液的每一个PH值，都有其相应的缓冲量。缓冲容量实际上是一个微分比，可定义为：使1升缓冲溶液的PH值增高很小一个数值dPH时，需加入的强碱物质的量为db，则db与dPH之比值叫缓冲容量，用数学式表示为β=db/dPH缓冲mol·L－1·PH－1。...
在配制具有一定PH值的缓冲溶液时，为了使所得溶液具有较好的缓冲能力，应注意以下原则： 1．选择适当的缓冲对，使配制溶液的PH值在所选择的缓冲对的缓冲范围内。这个范围大约在PKa±1之内。例如HOAc-OAc-缓冲对的范围是3.7-5.6，要配制PH从3.7-5.6之间的缓冲溶液可选用这一缓冲对。 2．缓冲对中作为 共轭 酸的PKa，应尽量接近于配制溶液的PH...
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