...ester, DNP)。通过酰胺化反应把半抗原结合到抗体分子上。在间接法(二步法)中,先以半抗原标记的特异性抗体(第一抗体)孵育切片,然后加入半抗原的标记抗体,(标记物可为荧光素或酶)(图6-4)。在PAP染色(三步法)中,先用半抗原标记的第一...
...ester, DNP)。通过酰胺化反应把半抗原结合到抗体分子上。在间接法(二步法)中,先以半抗原标记的特异性抗体(第一抗体)孵育切片,然后加入半抗原的标记抗体,(标记物可为荧光素或酶)(图6-4)。在PAP染色(三步法)中,先用半抗原标记的第一...
...10μg/ml加2.5μg/ml生物素,应用0.05mol/l Tris—HCl液,pH7.6,在应用前30min配制。(3)ABC法的评价及实验注意事项ABC法具有:①敏感性强:Hsu等应用ABC法与PAP法相比发现敏感性较PAP法高20~...
...最佳工作液浓度。一般认为酶标抗体可用稍离浓度,例如HRP标记抗体为1:80~160、ALP标记抗体为1:50~100染色较理想。PAP法染色时,连结抗体稀释1:50、PAP复合物用1:50~200染色较合适。4.抗体的保存 为确保ICC染色...
...标记的过氧化物酶—抗过氧化物酶技术(即PAP法,见第四章 )。二、电镜标本制备方法免疫酶细胞化学技术可用于包埋前和包埋后染色,但以前者应用较多。1.单层细胞培养物免疫酶染色法(1)用4%多聚甲醛(在0.05mol/l 磷酸缓冲液中,pH...
...80~160、ALP标记抗体为1:50~100染色较理想。PAP法染色时,连结抗体稀释1:50、PAP复合物用1:50~200染色较合适。4.抗体的保存 为确保ICC染色结果稳定、再现性良好,应避免抗体反复冻融所致的效价降低。第一抗体分装、...
...抗原性与抗酶抗体相同,所以能与桥抗体结合,但不能与酶结合,影响组织抗原的显示。为此70年代初,Sternberger(1970)又建立了PAP法,并加以改良,现为ICC研究中常用的方法之一。...
...应当根据设备条件,具备的抗体和示踪抗原的特点进行选择。我们的经验是:因胞浆性抗原含量较多,可以用简便和廉价的间接法甚至直接法免疫细胞化学染色;对膜抗原及其它一些微量抗原应当选用PAP或ABC法,如果同时进行两种以上抗原的检查,最好进行双...
...前列腺特异性酸性磷酸酶(prostatic acid phosphatase,PAP)是酸性磷酸酶同工酶,由前列腺上皮细胞溶酶体产生,是一种由两个相同亚单位组成的糖蛋白,其分子量为100kD,等电点4.4~5.5,半衰期为1.1~2.6...
...前列腺特异性酸性磷酸酶(prostatic acid phosphatase,PAP)是酸性磷酸酶同工酶,由前列腺上皮细胞溶酶体产生,是一种由两个相同亚单位组成的糖蛋白,其分子量为100kD,等电点4.4~5.5,半衰期为1.1~2.6...
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