某些抗原可以用荧光素标记，制成荧光抗原，标记荧光素的方法与制备荧光抗体方法相同。用荧光抗原可以直接检查细胞或组织内的相应抗体，特异性较好，敏感性较差。染色方法同荧光抗体染色的直接法。由于多数抗原难以提纯或量少不昂贵，一般很少采用此法。
应用于电镜水平的免疫法，可分为包埋前染色和包埋后染色，由于包埋前染色对细胞膜的穿透性差，一般只用于细胞表面的抗原标记，如需穿透细胞膜，则需辅以冻融法或加入Triton X—100、皂素等活性剂，后者会加重细胞超威结构的破坏，因此，现较普遍采用包埋后染色，现分别介绍如下：
若切片或其他标本经某种荧光抗体染色后，未获得阳性结果，而又疑有另外的病原体存在时，可用相应的荧光抗体再染色。 有时存档蜡块不能再用以切片，也可用存档的HE染色标本，褪去盖片和颜色，再作免疫荧光或其它免疫细胞化学的染色。
本法应用直接法或间接法的原理和步骤，可对活细胞在试管内进行染色，常用于T和B细胞、细胞培养物、瘤细胞抗原和受体等的检查和研究，阳性荧光主要在细胞膜上。FACS即采用此法原理。
...。然后用4℃含蔗糖PBS反复冲洗数次。4 ℃ 浸漂过夜。 （4）2.5%戊二醛（pH7.4磷酸缓冲液）再固定1h，4 ℃ 用含蔗糖PBS反复冲洗去戊醛，每次5min，共洗3次。 （5）DAB-H 2 O 2 显色15～30min。 （6）0.05mol/l PBS冲洗3次，每次30min，再置于室温中用1%～2%锇酸固定1h， 脱水 、包埋、切片复染和观察。
...亲合力要高出100万倍，能够彼此牢固结合而不影响彼此的生物学活性。同时，生物素与卵白素都具有与其它示踪物质如荧光素、铁蛋白和过氧化酶等相结合的能力。免疫细胞化学工作者利用上述特性，建立了卵白素—生物素免疫染色系统。由于维生素H习惯上称为生物素，为便于理解，现在译名上统称卵白素为抗生物素或亲合素。所以卵白素—生物素免疫染色系统又称为抗生物素—生物素免疫染色法。
...05mol/l 磷酸缓冲液中，pH7.2）在原位固定（4 ℃ ）1h。 （2）用0.05mol/l PBS充分洗涤后，用HRP标记的抗体血清作用18h，再用PBS充分洗涤。 （3）2%戊二醛固定1h，再水洗。 （4）呈色反应，用DAB—H 2 O 2 呈色反应，水洗。 （5）1%锇酸后固定30min～1h，原位用环氧树脂包埋，光镜作半薄切片定位，作超薄切片。
... （2）置1%H 2 O 2 内10min至1h（视树脂的硬度和切片的厚度而定），以去锇酸和增进树脂穿透性，有利抗体进入。如切片很薄或于低温包埋时，此步可省略。操作时，滴入1%H 2 O 2 液1滴于蜡板上，将网的载片面轻浮于液滴上。对中枢神经系统切片，有主张以1%过碘酸钾（KIO 4 ）代替H 2 O 2 的。 （3）双蒸水洗3次，每次10min，第1，2...
...7.4洗3min×3 （12）1%锇酸（0.1mol/l PBS溶液）1h。 （13）双蒸水洗15min。 （14）系列酒精或丙酮 脱水 ，包埋、超薄切片。（15）枸椽酸铅对照染色。 为增加抗非特异性染色，有的实验室倾向在TBS中加入1%小 牛血 清白蛋白（Bovine Serum Albumin, BSA, Sigma）。理想的免疫金染色切片，背景应清洁，...
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