...后,利用抗生物素抗体-结合蛋白A-金标记杂交体的超微结构定位,类似免疫电镜中的包埋后染色。在包埋剂应用方面,有报告应用环氧树脂包埋获得成功的。但大多数较满意的结果均获自低温亲水性包埋剂——Lowicryl-K4M,也有应用LR-white...
...免疫酶和免疫荧光染色技术,特别有助于发现滴度低的同种抗血清和含抗原量较少的组织。②可用于双重免疫染色。利用两种交叉反应的半抗原如阿散酸和对氨基苯酰甘氨酸分别标记来自同一种动物的两种特异性(第一抗体)血清,应用两步法或三步法,即可在同一张切片...
...免疫酶和免疫荧光染色技术,特别有助于发现滴度低的同种抗血清和含抗原量较少的组织。②可用于双重免疫染色。利用两种交叉反应的半抗原如阿散酸和对氨基苯酰甘氨酸分别标记来自同一种动物的两种特异性(第一抗体)血清,应用两步法或三步法,即可在同一张切片...
...应用于电镜水平的免疫法,可分为包埋前染色和包埋后染色,由于包埋前染色对细胞膜的穿透性差,一般只用于细胞表面的抗原标记,如需穿透细胞膜,则需辅以冻融法或加入Triton X—100、皂素等活性剂,后者会加重细胞超威结构的破坏,因此,现较普遍...
...细胞质、核质、或线粒体基质的面)和PF(向细胞外间隙或内间隙的面)。从70年代初期开始,冷冻蚀刻免疫电镜技术已开始在应用,但由于免疫标记必须在冷冻蚀刻步骤以前进行,所以仅能标记细胞外表面(ES)。80年代开始建立了断裂—标记细胞化学方法,将...
..., 1982) 5.PAP免疫电镜双重标记 第四节 免疫电镜胶体金标记法 一、电镜水平的免疫金染色法 1.包埋后染色 2.包埋前染色 二、胶体金标记蛋白A技术(Protein A-goldtechnique, PAg法) 1.蛋白A—金(...
...包埋后染色法(Ordronneau, 1982) ◦ 5.PAP免疫电镜双重标记 第四节 免疫电镜胶体金标记法 一、电镜水平的免疫金染色法 ◦ 1.包埋后染色 ◦ 2.包埋前染色 二、胶体金标记蛋白A技术(Protein ...
...免疫酶细胞化学技术是以酶作为抗原抗体反应的标记物,在既不改变抗原抗体的免疫反应特异性也不影响酶活性的条件下,与相应的酶底物作用,形成一种不溶性的反应产物。在光学显微镜下观察时,要求反应的终末产物是不溶性的有色物质,具有可观察性。在电镜下...
...。3.免疫标记与透射免疫电镜的原则及步骤基本相同。免疫金银染色法举例(张留保等,1997)(1)血细胞以PBS—BSA冲洗5min×3。(2)2%多聚甲醛—戊二醛混合液固定,4℃,1h(3)PBS或TBS反复冲洗5min×3。(4)胶体金...
...Romano(1977)首次报告用于标记细胞表面抗原、包括淋巴细胞、血小板、大鼠肾脏细胞及感染的病毒细胞获得成功以后,已得到愈来愈广泛的应用(详见第七章 ),是一种较为理想的免疫电镜技术。...
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