...敏感,此菌营养要求高,在普遍蛋白胨水或肉汤中不能生长,在固体培养基上Goodwin(1985)推荐以脑一心浸液琼脂为基础,加入7%马血清,1%Isovitalix(BBL),万古霉素2mg/L,萘啶酮酸20mg/L,两性霉素2mg/L。该菌...
...,证明型别无误。1.3.8质粒检查应做该质粒的酶切图谱,应与原始质粒相符。1.4种子液制备1.4.1菌种传代用LB培养基液体LB培养基不含琼脂,供摇床培养用,含2%琼脂供制备平板和斜面用,含0.5%琼脂的半固体供短期保存菌种用。1.4.2...
...,证明型别无误。1.3.8质粒检查应做该质粒的酶切图谱,应与原始质粒相符。1.4种子液制备1.4.1菌种传代用LB培养基液体LB培养基不含琼脂,供摇床培养用,含2%琼脂供制备平板和斜面用,含0.5%琼脂的半固体供短期保存菌种用。1.4.2...
...1.感受态细胞的制备(1)用JM101或TG1等菌的培养菌液在M9基本培养基平板上的划线培养,于37℃温育24~36h。(2)批量制备冻存的感受态细胞的方法,同大肠杆菌感受态细胞的制备。2.用M13噬菌体转染感受态细胞(1)用2×YT或...
...4)37℃水浴5min。(5)加入无相应抗生素的Lb200μl,混匀后,37℃水浴30~60min。(6)分别取3组反应物各50μl在含相应抗生素的固体LB培养基平皿上涂布,室温下干燥,然后倒置于37℃温箱中培养过夜。(三)转化子DNA的...
...DNA试剂盒或采用下述方法:1.挑取一些独立的转化菌落进行小规模培养,用无菌牙签或挑种环挑取单菌落于2ml含有相应抗生素的LB液体培养基中,于37℃剧烈振摇下培养过夜。2.将1.5ml培养物倒入微量离心管中,用微量离心机于4℃以12000g离心...
...检定,合格后方可投产。1.3.1划种LB琼脂平板应呈典型大肠杆菌集落形态,无其他杂菌生长。1.3.2涂片革兰氏染色在光学显微镜下观察,应为典型的革兰氏阴性杆菌。1.3.3对抗生素的抗性应与原始菌株相符。1.3.4电镜检查应为典型大肠杆菌形态...
...检定,合格后方可投产。1.3.1划种LB琼脂平板应呈典型大肠杆菌集落形态,无其他杂菌生长。1.3.2涂片革兰氏染色在光学显微镜下观察,应为典型的革兰氏阴性杆菌。1.3.3对抗生素的抗性应与原始菌株相符。1.3.4电镜检查应为典型大肠杆菌形态...
...于2ml含有相应抗生素的LB液体培养基中,于37℃剧烈振摇下培养过夜。2.将1.5ml培养物倒入微量离心管中,用微量离心机于4℃以12000g离心30s,将剩余的培养物贮存于4℃。3.吸取培养液,使细菌沉淀尽可能干燥。4.将细菌沉淀重悬于...
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