...目的序列与载体DNA正确连接的效率、重组导入细胞的效率都不是百分之百的,因而最后生长繁殖出来的细胞并不同都带有目的序列。一般一个载体只携带某一段外源DNA,一个细胞只接受一个重组DNA分子。最后培养出来的细胞群中只有一部分、甚至只有很小...
...DNA序列的突变;或直接对某基因的片段进行DNA序列测定,与正常的相应的DNA序列比较,检测有否突变发生。这几种方法为较常使用的方法。有关这些方法的详细介绍可参见本书第十六章的生物化学检验技术篇。本节主要介绍ApoB,ApoE,Apo(a)...
...上述传统的HLA分型方法有许多不足之处,近年来国内外已将HLA分型技术由抗原水平发展到基因水平。(一)限制性片段长度多态性检测技术这是首先建立的对多态性进行检测的DNA分析技术。个体间抗原特异性来自氨基酸顺序的差别,后者由编码基因的碱基...
...序列,就是该生物完整的基因组文库,能从这文库中钓取该生物的全部基因或DNA序列。从基因组含有生物生存、活动和繁殖的全部遗传信息的概念出发,基因组文库是具有生物种属特异性的。构建基因组文库,再用分子杂交等技术去钓取基因克隆的方法,称为鸟枪法或...
...中的4种碱基各自的异构体间都可以自发地相互变化(例如烯醇式与酮式碱基间的互变),这种变化就会使碱基配对间的氢键改变,可使腺嘌呤能配上胞嘧啶、胸腺嘧啶能配上鸟嘌呤等,如果这些配对发生在DNA复制时,就会造成子代DNA序列与亲代DNA不同的错误性...
...识别DNA的碱基序列,与其发生相互作用的基础。DNA双螺旋的稳定由互补碱基对之间的氢键和碱基对层间的堆积力(base�stacking force)维系。DNA双螺旋中两股链中碱基互补的特点,逻辑地预示了DNA复制过程是先将DNA分子中的两...
...这是在上述筛选后的进一步分析。目的序列插入载体会使载体DNA限制性酶图谱(restriction map)发生变化,例如一个长600bp的目的序列利用它两端的EooR I和SalI切后的粘末端连接插入pUC19的多克隆点,则重组质粒就增大...
...以下几方面加强研究,以期达到“真伪优劣”鉴别的最终目标。 一、寻找进化速率快、种间高度变异的DNA序列进行测序分析。如叶绿体基因间隔区trnD-trnT,rpoB-trnC、trnH-psbA等。品种特征DNA序列的获得是将其转化为简易、...
...变性(单链)状态。这说明降温时间太短以及温差大均不利于复性。DNA浓度。溶液中DNA分子越多,相互碰撞结合的机会越大。DNA顺序的复杂性。简单顺序的DNA分子,如多聚(A)和多聚(U)这二种单链序列复性时,互补碱基的配对较易实现。而顺序复杂的...
...据新华社讯 日前,经过多年野外标本采集和室内研究工作,中科院微生物研究所科研人员对冬虫夏草进行DNA测序后得到100多条相关的“分子序列”,并建立起冬虫夏草DNA数据库和分子鉴定体系,保证有关生物材料的准确鉴定。 经过和国际基因银行进行...
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