一、分离脂蛋白 血浆是分离纯化脂蛋白的首选标本。从血浆(血清)中可分离得到CM、VLDL、LDL和HDL,再经脱脂除去脂蛋白中的脂质,剩下的部分为载脂蛋白的混合物。这一操作过程是获得载脂蛋白的最佳方法。 二、脱脂 由于各种脂蛋白含脂的种类和质量不同,脱脂剂组成略有差异。目前常用的几种脱脂方法有如下几种。 1.Warnick等法 将纯化的脂蛋白慢慢加入到预冷(...
(一)原理 以聚丙烯酰胺为支持介质,血清脂质用染料预染,使脂蛋白着色,经电泳后,一般可分出三条区带,即β-、前β-、α-脂蛋白。并可用光密度扫描仪检测其相对百分数,乘以总脂量,可求出三种脂蛋白的含量。 (二)试剂与仪器 1.试剂 (1)分离胶缓冲液:三羟甲基氨基甲烷(Tris)18.3g,lmol/L盐酸24ml,加水至100ml(pH8.9)。 (2)丙烯...
与制备性超速离心不同的是:分析性超速离心主要是为了研究生物大分子的沉降特性和结构,而不是专门收集某一特定组份。因此它使用了特殊的转子和检测手段,以便连续监视物质在一个离心场中的沉降过程。 (一)分析性超速离心的工作原理 分析性 超速离心机 主要由一个椭圆形的转子、一套 真空 系统和一套光学系统所组成。该转子通过一个柔性的轴联接成一个高速的驱动装置,此轴可使转...
一、分离脂蛋白 血浆是分离纯化脂蛋白的首选标本。从血浆(血清)中可分离得到CM、VLDL、LDL和HDL,再经脱脂除去脂蛋白中的脂质,剩下的部分为载脂蛋白的混合物。这一操作过程是获得载脂蛋白的最佳方法。 二、脱脂 由于各种脂蛋白含脂的种类和质量不同,脱脂剂组成略有差异。目前常用的几种脱脂方法有如下几种。 1.Warnick等法 将纯化的脂蛋白慢慢加入到预冷(...
一、血清脂蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳
...值,再加水到1L。 溶液①(d=1.006):NaCl 11.40g,0.5ml0.5mol/L EDTA液,加去离子水1l,EDTA可抑制脂蛋白中脂质的氧化。 溶液②(d=1.182):NaBr24.98g溶于溶液①100ml中。 溶液③(d=1.478):NaBr78.32溶于溶液②100ml中。 0.15mol/LNaCl,0.3mlEDTA:8.77...
一、分离脂蛋白 血浆是分离纯化脂蛋白的首选标本。从血浆(血清)中可分离得到CM、VLDL、LDL和HDL,再经脱脂除去脂蛋白中的脂质,剩下的部分为载脂蛋白的混合物。这一操作过程是获得载脂蛋白的最佳方法。 二、脱脂 由于各种脂蛋白含脂的种类和质量不同,脱脂剂组成略有差异。目前常用的几种脱脂方法有如下几种。 1.Warnick等法 将纯化的脂蛋白慢慢加入到预冷(...
一、分离脂蛋白 血浆是分离纯化脂蛋白的首选标本。从血浆(血清)中可分离得到CM、VLDL、LDL和HDL,再经脱脂除去脂蛋白中的脂质,剩下的部分为载脂蛋白的混合物。这一操作过程是获得载脂蛋白的最佳方法。 二、脱脂 由于各种脂蛋白含脂的种类和质量不同,脱脂剂组成略有差异。目前常用的几种脱脂方法有如下几种。 1.Warnick等法 将纯化的脂蛋白慢慢加入到预冷(...
研究载脂蛋白的前提条件是必须得到各种载脂蛋白的纯品,然而各种载脂蛋白的理化性质、分子量、氨基酸组成及其构象相差很大,因此必须根据各自的特性采用不同的方法进行分离纯化,才能达到获得纯品的目的。有关文献报导,目前分离纯化载脂蛋白方法和仪器种类很多,而常用的方法包括四个步骤即:①分离脂蛋白;②脱脂获得脂蛋白中的载脂蛋白部分即ApoHDL、ApoVLDL、ApoLD...
研究载脂蛋白的前提条件是必须得到各种载脂蛋白的纯品,然而各种载脂蛋白的理化性质、分子量、氨基酸组成及其构象相差很大,因此必须根据各自的特性采用不同的方法进行分离纯化,才能达到获得纯品的目的。有关文献报导,目前分离纯化载脂蛋白方法和仪器种类很多,而常用的方法包括四个步骤即:①分离脂蛋白;②脱脂获得脂蛋白中的载脂蛋白部分即ApoHDL、ApoVLDL、ApoLD...
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