为了研究,常需要得到脂蛋白纯品并进一步分离纯化载脂蛋白,迄至目前为止,采用密度梯度超速离心分离纯化各种脂蛋白仍是一种很好的方法。 超速离心法可分为制备型和分析型两种,根据其所用介质密度不同,可以分为等密度离心,密度梯度离心等。根据所用转头的类型不同可以分为角头、甩平头、垂直头和区带头离心法。脂蛋白分离中,采用密度梯度超速离心法较多。 离心作用是根据稳定角速度...
一、超速离心法简介
...值,再加水到1L。 溶液①(d=1.006):NaCl 11.40g,0.5ml0.5mol/L EDTA液,加去离子水1l,EDTA可抑制脂蛋白中脂质的氧化。 溶液②(d=1.182):NaBr24.98g溶于溶液①100ml中。 溶液③(d=1.478):NaBr78.32溶于溶液②100ml中。 0.15mol/LNaCl,0.3mlEDTA:8.77...
(一)原理 以琼脂糖凝胶为支持介质,先用脂类染料将血清进行预染,使血清脂蛋白着色,然后电泳。切下各脂蛋白区带,加热溶解,冷却后比色。或者用光密度计直接扫描仪定各区带。计算出α、β-和前β-脂蛋白的相对百分比。 (二)试剂 1.巴比妥HCl缓冲液(pH8.6,离子强度0.075):称取巴比妥钠15.5g,加入1mol/LHCl12ml,混匀溶解,加蒸馏水至10...
血浆脂蛋白和脂质测定是临床生化检验的常规测定项目,其临床意义主要是:①早期发现与诊断 高脂蛋白血症 ;②协助诊断 动脉粥样硬化 症;③评价动脉粥样 硬化 疾患如 冠心病 脑梗塞 等危险度;④监测评价饮食与药物治疗效果。 血浆脂蛋白测定分离的常用方法有超速离心法、沉淀分离法、电泳分离法及免疫分离法。根据脂蛋白分离纯化或定性定量等不同的需要可以选择不同的方法,如...
一、分离脂蛋白 血浆是分离纯化脂蛋白的首选标本。从血浆(血清)中可分离得到CM、VLDL、LDL和HDL,再经脱脂除去脂蛋白中的脂质,剩下的部分为载脂蛋白的混合物。这一操作过程是获得载脂蛋白的最佳方法。 二、脱脂 由于各种脂蛋白含脂的种类和质量不同,脱脂剂组成略有差异。目前常用的几种脱脂方法有如下几种。 1.Warnick等法 将纯化的脂蛋白慢慢加入到预冷(...
血浆脂蛋白和脂质测定是临床生化检验的常规测定项目,其临床意义主要是:①早期发现与诊断 高脂蛋白血症 ;②协助诊断 动脉粥样硬化 症;③评价动脉粥样 硬化 疾患如 冠心病 脑梗塞 等危险度;④监测评价饮食与药物治疗效果。 血浆脂蛋白测定分离的常用方法有超速离心法、沉淀分离法、电泳分离法及免疫分离法。根据脂蛋白分离纯化或定性定量等不同的需要可以选择不同的方法,如...
血浆脂蛋白和脂质测定是临床生化检验的常规测定项目,其临床意义主要是:①早期发现与诊断 高脂蛋白血症 ;②协助诊断 动脉粥样硬化 症;③评价动脉粥样 硬化 疾患如 冠心病 脑梗塞 等危险度;④监测评价饮食与药物治疗效果。 血浆脂蛋白测定分离的常用方法有超速离心法、沉淀分离法、电泳分离法及免疫分离法。根据脂蛋白分离纯化或定性定量等不同的需要可以选择不同的方法,如...
一、分离脂蛋白 血浆是分离纯化脂蛋白的首选标本。从血浆(血清)中可分离得到CM、VLDL、LDL和HDL,再经脱脂除去脂蛋白中的脂质,剩下的部分为载脂蛋白的混合物。这一操作过程是获得载脂蛋白的最佳方法。 二、脱脂 由于各种脂蛋白含脂的种类和质量不同,脱脂剂组成略有差异。目前常用的几种脱脂方法有如下几种。 1.Warnick等法 将纯化的脂蛋白慢慢加入到预冷(...
血浆脂蛋白和脂质测定是临床生化检验的常规测定项目,其临床意义主要是:①早期发现与诊断 高脂蛋白血症 ;②协助诊断 动脉粥样硬化 症;③评价 动脉粥样硬化 疾患如 冠心病 脑梗塞 等危险度;④监测评价饮食与药物治疗效果。 血浆脂蛋白测定分离的常用方法有超速离心法、沉淀分离法、电泳分离法及免疫分离法。根据脂蛋白分离纯化或定性定量等不同的需要可以选择不同的方法,如...
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