...胶体金与蛋白质的结合成功与否,取决于pH值,一般只有在蛋白质等电点(PI)略偏碱的条件下二者才能牢固地结合,因此,标记之前须将胶体金溶液的pH值调至待标记蛋白质的等电点略偏碱。需要提高胶体金的pH值时可用0.1molK2CO3,需要降低...
...酒精或丙酮脱水,常规电镜包埋。⑦切半薄片,光镜定位合适的断裂部位,再切超薄切片,铀铅染色,透射电镜观察。断裂标记法目前文献报告应用较多的是植物凝集素—胶体金免疫标记技术,常用的如刀豆球蛋白(Con A)-- 胶体金免疫标记技术,如第六章 所述...
...柠檬酸钠、鞣酸、抗坏血酸、白磷、硼氢化钠等。根据还原剂类型以及还原作用的强弱,可以制备0.8nm~150nm不等的胶体金。最常用的制备方法为柠檬酸盐还原法。具体操作方法如下:(1)将HauC14先配制成0.01%水溶液,取100ml加热至沸...
...较小的,易于辨认的标记物。常用的标记物为颗粒性标记物。依其特性可分为:1.蛋白类 如血蓝蛋白、铁蛋白等。2.病原体类 如烟草花叶病毒、南方菜豆花叶病毒、噬菌体T4、大肠杆菌f2、噬菌体等。3.金属颗粒胶体金、免疫金银标记技术和同位素放射性自...
...PAg)复合物的制备(Slot 和Geuze,1981) 2. 三、胶体金双标记技术(常用为蛋白A—胶体金) 四、免疫电镜金—银法染色技术 第五节 其它免疫电镜技术 一、凝集素电镜标记技术 二、扫描免疫电镜技术 (一)标记物 (二)免疫标记...
...A-goldtechnique, PAg法) ◦ 1.蛋白A—金(PAg)复合物的制备(Slot 和Geuze,1981) ◦ 2. 三、胶体金双标记技术(常用为蛋白A—胶体金) 四、免疫电镜金—银法染色技术 第五节 其它免疫电镜技术 一、凝集素电镜标记技术 ...
...(一)玻璃器皿的清洁制备胶体金的成功与失败除试剂因素以外玻璃器皿清洁是非常关键的一步。如果玻璃器皿内不干净或者有灰尘落入就会干扰胶体金颗粒的生成,形成的颗粒大小不一,颜色微红、无色或混浊不透明。我们的经验是制备胶体金的所有玻璃器皿先用...
...应逐滴加入,1mg的蛋白质大约5min加完。(3)在磁性搅拌下加入5%的牛血清白蛋白(BSA)使其终浓度为1%,或加入3%聚乙二醇(PEg MW20000)使其终浓度为0.05%, 我们对比了BSA和PEG稳定胶体金的效果,BSA稳定的标记...
...此项技术得到了迅速发展和广泛应用。应用胶体金为标记物的免疫金染色(IGS)与免疫金银染色(IGSS)方法在光镜和电镜下可以单标记和双标记或多种标记同时观察细胞和组织结构,可以定性,定位以至定量研究。目前它已被应用于医学和生物学研究的众多领域。...
...此项技术得到了迅速发展和广泛应用。应用胶体金为标记物的免疫金染色(IGS)与免疫金银染色(IGSS)方法在光镜和电镜下可以单标记和双标记或多种标记同时观察细胞和组织结构,可以定性,定位以至定量研究。目前它已被应用于医学和生物学研究的众多领域。...
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