...min。 （3）切片用PBS洗2次，每次5min。用电磁搅拌或振荡帮助洗净不参与反应的血清蛋白。吹干。 （4）滴加抗人IgG或γ-球蛋白荧光抗体（用0.01%伊文氏蓝稀释）覆盖切片，37 ℃ 中放置30min。 （5）用PBS洗2次，方法同步骤（3），随后，再用蒸馏水洗1min。 （6）缓冲甘油（pH9.0～9.5,PBS或碳酸盐缓冲液1份和1份甘油混合）封...
抗皮肤成分的自身抗体在 疱疹 性皮肤病中具有诊断和鉴别诊断意义，寻常性 天疱疮 具有 鳞状上皮 细胞间隙抗体，类天疱疮具有基底膜带抗体。这种自身抗体无种属特异性。用直接免疫荧光法检测皮肤活检组织，间接法可用以检测病 人血 清中的抗皮肤成分抗体。 1．抗原切片直接法免疫荧光细胞化学检查，可以取病人皮肤活检组织作冰冻切片。 间接法检查常用大白鼠，豚鼠的食道上1/...
抗横纹肌自身抗体出现在50%以上的肌 无力 症和 胸腺瘤 病人，正常人未发现。属IgG类抗体，用间接免疫荧光法检测此抗体，准确简便。 1．抗原切片取人或大白 鼠骨 骼肌，沿肌纤维平行方向作冰冻切片，不固定。 2．间接法免疫荧光染色方法染色的方法步骤与其他自身抗体间接法相同，但在荧光抗体染色之后，要延长PBS洗涤时间，3次PBS洗涤，每次30min。封裱切片。...
...min。 （3）切片用PBS洗2次，每次5min。用电磁搅拌或振荡帮助洗净不参与反应的血清蛋白。吹干。 （4）滴加抗人IgG或γ-球蛋白荧光抗体（用0.01%伊文氏蓝稀释）覆盖切片，37 ℃ 中放置30min。 （5）用PBS洗2次，方法同步骤（3），随后，再用蒸馏水洗1min。 （6）缓冲甘油（pH9.0～9.5,PBS或碳酸盐缓冲液1份和1份甘油混合）封...
...Ph7.4 Tris HCl缓冲液，制成匀浆后进行浓度梯度离心（27000rpm×60min），沉淀物中加入蒸馏水90ml，再以超声粉碎仪将细胞打碎，离心（3000rpm×15min）取上清液，再加入一定量的1mol/l 硫酸，使硫酸的最终浓度为0.2mol/L,混匀后，离心（3000rpm×15min），取上清液，加入4～5倍体积的无水乙醇，置于-20 ℃...
...人血清中分离的IgM和IgM类SMA进行吸收试验，证明了SMA的特异性。Holborrow Gamel和Renbe先后观察了SMA与 鼠肝 细胞，肾小球及人的甲状腺上皮细胞和血小板等组织为抗原的免疫荧光染色结果，证明这些组织的抗原性均与平滑肌肌动蛋白有着共同性抗原。 现在多以大白鼠胃壁和肾组织血管壁平滑肌的4～6μm冰冻切片和抗原，附贴在干净的盖玻片上，电扇...
...min。 （3）切片用PBS洗2次，每次5min。用电磁搅拌或振荡帮助洗净不参与反应的血清蛋白。吹干。 （4）滴加抗人IgG或γ-球蛋白荧光抗体（用0.01%伊文氏蓝稀释）覆盖切片，37 ℃ 中放置30min。 （5）用PBS洗2次，方法同步骤（3），随后，再用蒸馏水洗1min。 （6）缓冲甘油（pH9.0～9.5,PBS或碳酸盐缓冲液1份和1份甘油混合）封...
Roitt等（1956）和Witebsby等（1957）就发现桥本氏病 人血 清中有对甲状腺提取的抗体活性，后来White（1957）首次用间接免疫荧光染色方法研究桥本氏病人血清存在对甲状腺胶质（thyroidcolloid）的抗体获得成功。此后，Landing等（1958）和Holbrow等（1959）以不固定的甲状腺切片作抗原。检查出慢性甲状腺炎（Chr...
在诊断Sjogren’s综合征时检测唾液腺外分泌导管上皮细胞抗体具有重要意义，阳性率达65%，用人或猴唾液腺组织（O型）不固定的冰冻切片，间接免疫荧光细胞化学法检测，可见导管上皮细胞浆呈黄绿色荧光。
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