原位杂交组织化学(In situ hybridization histochemistry, ISHH)是应用已知碱基顺序并带有标记物的核酸探针与组织、细胞中待测的核酸按碱基配对的原则进行特异性结合,形成杂交体,然后再应用与标记物相应的检测系统,通过组织化学或免疫组织化学方法在核酸原有的位置进行细胞定位。这一技术为研究单一细胞中编码各处蛋白质、多肽的相应mR...
...探针的种类和标记物的不同,在具体应用的技术方法上也各有差异,但其基本方法和应用原则大致相同。大致可分为:①杂交前准备,包括固定、取材、玻片和组织的处理,如何增强核酸探针的穿透性、减低背景染色等;②杂交;③杂交后处理;④显示(visual-ization):包括放射性自显影和非放射性标记的显色。 (一)固定 原位杂交组织化学技术(In Situ Hybridi...
Friou等(1957)首先用免疫荧光细胞化学技术检查 系统性红斑狼疮 病 人血 清中的抗核抗体后,随后,在多种自身免疫性疾病的诊断中,广泛应用了免疫细胞化学方法,为这类疾病的诊断和研究提供了重要的依据。 所谓自身免疫性疾病是指自身免疫反应引起组织损伤的疾病。在临床方面,有的自身免疫性疾病已明确是自身抗体直接作用于自身抗原产生的自身免疫应答所致;有的则难以证...
中华骨科杂志 2000年第0期第20卷 骨肿瘤 作者:丘钜世李扬王连唐 单位:中山医科大学病理教研室广州,510080 肿瘤的抗原性与肿瘤的组织来源及组织分化有密切的联系 。原发性骨肿瘤多来源于间胚叶组织,有着共同的抗原决定簇 ,如中间丝蛋白Vimentin,可籍与其它组织(上皮组织、神经组织 、肌肉组织等)来源的肿瘤相区别。但随着肿瘤组织分化表型 的不同,...
原位杂交组织(或细胞)化学技术简称原位杂交(In situhybridization),如上所述,属于固相核酸分子杂交的范畴。但它区别于固相核酸分子杂交中的任何一种核酸分子杂交技术。菌落杂交系细菌裂解释放出DNA,然后进行杂交。Southern印迹杂交法是以鉴定DNA中某一特定的基因片段,而Norhtern印迹杂交法是用以检测某一特定的RNA片段的。它们都只...
原位杂交组织化学(In situ hybridization histochemistry, ISHH)是应用已知碱基顺序并带有标记物的核酸探针与组织、细胞中待测的核酸按碱基配对的原则进行特异性结合,形成杂交体,然后再应用与标记物相应的检测系统,通过组织化学或免疫组织化学方法在核酸原有的位置进行细胞定位。这一技术为研究单一细胞中编码各处蛋白质、多肽的相应mR...
Friou等(1957)首先用免疫荧光细胞化学技术检查 系统性红斑狼疮 病 人血 清中的抗核抗体后,随后,在多种自身免疫性疾病的诊断中,广泛应用了免疫细胞化学方法,为这类疾病的诊断和研究提供了重要的依据。 所谓自身免疫性疾病是指自身免疫反应引起组织损伤的疾病。在临床方面,有的自身免疫性疾病已明确是自身抗体直接作用于自身抗原产生的自身免疫应答所致;有的则难以证...
Friou等(1957)首先用免疫荧光细胞化学技术检查 系统性红斑狼疮 病 人血 清中的抗核抗体后,随后,在多种自身免疫性疾病的诊断中,广泛应用了免疫细胞化学方法,为这类疾病的诊断和研究提供了重要的依据。 所谓自身免疫性疾病是指自身免疫反应引起组织损伤的疾病。在临床方面,有的自身免疫性疾病已明确是自身抗体直接作用于自身抗原产生的自身免疫应答所致;有的则难以证...
...相应的cDNA-mRNA杂交体稳定,但在原位杂交中是否如此尚未证明。cRNA探针不足之处在于有时比DNA探针粘性强(stickier)。可与组织产生较高的非特异性结合,但此缺陷可在杂交后漂洗液中加用酶漂洗来解决。最近,Wolf等(1987)建议插入确定长度的寡核苷酸至载体内产生cRNA分子,这种cRBA分子称为“寡核苷酸核酸探针”(oligoribo-pro...
原位杂交组织化学(In situ hybridization histochemistry, ISHH)是应用已知碱基顺序并带有标记物的核酸探针与组织、细胞中待测的核酸按碱基配对的原则进行特异性结合,形成杂交体,然后再应用与标记物相应的检测系统,通过组织化学或免疫组织化学方法在核酸原有的位置进行细胞定位。这一技术为研究单一细胞中编码各处蛋白质、多肽的相应mR...
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