...（一）基本原理应用DNA探针缺口翻译（nick translation）方法，通过碱基配对以一条DNA链为模板，将生物素标记的某一种脱氧三磷酸核苷酸如Bio-dUTP渗入有缺口的DNA链。将生物素标记的DNA探针与细胞或组织进行原位杂交。...
... EDTA,pH8.0终止显色。（22）甘油明胶直接封片。结果：杂交阳性部位着蓝黑色。组织处理及预杂交所用器皿需高温消毒，实验者需戴手套。（三）酶促生物素标记cRNA探针的应用基本方法和放射性标记cRNA探针同，所不同的是探针浓度为2.5μ...
...probes）已被成功的用于原位杂交实验。图20-2 示cDNA转录为cRNA，可标记以不同的标记物，然后与细胞中的mRNA相结合。Biotin(生物素)，Au(金)，digo-（地高辛）...
...，各1min，各1min。空气干燥。2．探针标记和纯化用缺口平移法将生物素11-dUTP标记在DNA核酸探针上。3．变性与杂交加20～100ng生物素标记探针到杂交液中，加入5μl 20mg/ml人或鲱鱼精子DNA，总容量为30～40μl，...
...Laboratories美国）的缺口平移法标记生物素试剂盒（bionick labeling system）为例介绍如下：试剂：10x dNTP Mix.250μl10x Enzyme Mix 250μl0.2mmol/L each dCTP，dCTP...
...引物法或末端加尾法等把修饰的核苷酸如生物素-11-dUTP掺入到探针DNA中，制成标记探针，敏感度高于化学修饰法，但操作程序复杂，产量低，成本高。化学修饰法是将不同标记物用化学方法连接到DNA分子上，方法简单，成本低，适用于大量制备（>50μ...
...固相法：将抗原或抗体吸附到固相载体表面，然后加待检标本，最后加标记抗体。测定固相载体的放射活性，常用的固相载体有溴化氰（CNBr）海豹化的纸片或聚苯乙烯小管（图20-7）。图20-7 固相放射免疫分析法原理放射免疫分析法应用范围广泛，包括...
...光敏DNP由一连接臂组成，一端是2，4-二硝基苯，另一端有芳基叠氮化合物。此法适用于含氨基检测基团。其敏感性和光敏生物素标记探针相同，检测时需要抗DNP抗体和免疫化学显色。标记方法：（1）DNA不心变性，必须溶于水中，取2～10μg10μ...
...标记DNA探针法 五、聚合酶链反应（PCR）标记高活性DNA探针 第四节 非放射性标记的核酸探针 一、生物素标记核酸探针方法 二、光敏生物素标记核酸探针 三、生物素-补骨脂素（Biotin -psoralen）标记法 四、生物素-α-氨基乙酸...
...一、生物素标记核酸探针方法 二、光敏生物素标记核酸探针 三、生物素-补骨脂素（Biotin -psoralen）标记法 四、生物素-α-氨基乙酸-N-羟基琥珀标记化学修饰的DNA法 五、缺口平移法标记生物素DNA探针（二步法） 六、生物素...
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